[1]韩凯凯,赵冬敏,黄欣梅,等.鸡传染性贫血病毒VP2蛋白原核表达、生物信息学分析及其多克隆抗体制备[J].江苏农业科学,2026,54(11):170-174.
　Han Kaikai,et al.Prokaryotic expression and bioinformatics analysis of VP2 protein of chicken infectious anemia virus and preparation of its polyclonal antibody[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2026,54(11):170-174.
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鸡传染性贫血病毒VP2蛋白原核表达、生物信息学分析及其多克隆抗体制备()

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第54卷
期数:
2026年第11期
页码:
170-174
栏目:
动物科学与动物医学
出版日期:
2026-06-05

文章信息/Info

Title:
Prokaryotic expression and bioinformatics analysis of VP2 protein of chicken infectious anemia virus and preparation of its polyclonal antibody
作者:
韩凯凯1; 2; 3;  赵冬敏1; 2; 3;  黄欣梅1; 2; 3;  刘宇卓1;  李银1; 2; 3;  章丽娇1;  杨婧1;  卢凤英1;  吴凤瑶1;  苏丹1;  尹馨1;  赵永前4;  刘青涛1; 2; 3
1.江苏省农业科学院兽医研究所，江苏南京 210014； 2.南京农业大学动物医学院，江苏南京 210095； 3.江苏大学生命科学学院，江苏镇江 212013； 4.江苏省农业科学院动物免疫工程研究所，江苏南京 210014
Author(s):
Han Kaikai; et al
关键词:
鸡传染性贫血病毒; VP2蛋白; 原核表达; 多克隆抗体
Keywords:
-
分类号:
S858.31
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
鸡传染性贫血(chicken infectious anemia，CIA)是一种严重危害家禽养殖业的免疫抑制病，在全球范围内均有发生。鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemia virus，CIAV)VP2蛋白又被称为辅助蛋白或者支架蛋白，对VP1蛋白中和表位的形成有重要影响。首先采用生物信息学方法预测VP2蛋白结构，然后以真核表达载体pFastBac1-VP2为模板，设计特异性引物PCR克隆CIAV VP2基因，构建原核表达载体pET28a-VP2。将经过鉴定的pET28a-VP2重组质粒转化入商品化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，加入IPTG诱导VP2蛋白表达，并确定VP2蛋白分布情况。利用Ni-NTA亲和层析法纯化VP2蛋白，获得重组VP2蛋白加入弗氏佐剂乳化后多点注射免疫小鼠，经3次免疫后采集小鼠血液，分离血清制备获得VP2蛋白多克隆抗体，并检测抗体效价和特异性。对VP2蛋白的结构信息运用生物信息学软件加以预测，结果显示该蛋白既不存在典型的跨膜螺旋结构，也未发现信号肽序列特征，为亲水性蛋白，含有多个B细胞抗原表位。收获的重组VP2蛋白大小约为26 ku，主要表达形式是包涵体。VP2蛋白多克隆抗体对原核表达的重组蛋白最高效价为1 ∶64 000，且能特异性识别CIAV蛋白。综上，制备获得的VP2蛋白多克隆抗体具有效价高和特异性强等特点，可用于ELISA和Western blot检测CIAV及VP2蛋白表达情况。
Abstract:
-

参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2025-07-28
基金项目：江苏省农业科技自主创新资金［编号：CX(24)2002］。
作者简介：韩凯凯(1983—)，男，河南新乡人，博士，副研究员，主要从事水禽疫病防控相关研究。E-mail:hankk0917@126.com。
通信作者：刘青涛，博士，研究员，从事水禽疫病诊断及产品开发研究。E-mail:495300103@qq.com。
更新日期/Last Update: 2026-06-05