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[1]黄欣媛,邹礼平,范红波.豆类活性肽PA1b在大肠杆菌中的多拷贝串联表达[J].江苏农业科学,2022,50(15):57-62.
　Huang Xinyuan,et al.Prokaryotic expression of multicopies of legume peptide PA1b in Escherichia coli[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2022,50(15):57-62.
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豆类活性肽PA1b在大肠杆菌中的多拷贝串联表达(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第50卷
期数:
2022年第15期
页码:
57-62
栏目:
生物技术
出版日期:
2022-08-05

文章信息/Info

Title:
Prokaryotic expression of multicopies of legume peptide PA1b in Escherichia coli
作者:
黄欣媛1; 邹礼平1; 范红波2
1.湖北工程学院湖北省植物功能成分利用工程技术研究中心，湖北孝感 432000；2.湖北职业技术学院医学基础部，湖北孝感 432000
Author(s):
Huang Xinyuan; et al
关键词:
PA1b; 重组基因表达; 多拷贝基因; 原核表达
Keywords:
-
分类号:
S188
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
为构建能表达串联豆类活性肽PA1b(pea albumin 1 subunit b)基因的重组大肠杆菌，并进行诱导表达和产物纯化。通过合成PA1b基因，采用同尾酶技术构建1~4拷贝数的串联PA1b基因，分别克隆至pET32a(+)原核表达载体上，转化入大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达，亲和层析纯化融合蛋白，肠激酶切除融合标签和切开串联体，获得单体PA1b肽。结果显示，大肠杆菌转化子中的重组质粒pET32a(+)-nPA1b(n=1~4)经PCR及测序验证正确，经1 mmol/L IPTG 25 ℃诱导8 h，均能以包涵体形式表达出重组融合蛋白。SDS-PAGE分析结果表明，串联拷贝数越多，融合蛋白中PA1b含量越高。Ni-NTA亲和纯化得到高纯度的4拷贝串联PA1b融合蛋白，经肠激酶充分酶切、超滤浓缩后获得重组PA1b多肽。获得了表达1~4拷贝串联PA1b基因的重组大肠杆菌，并通过酶解4拷贝PA1b融合蛋白制备了重组PA1b，为多拷贝法制备PA1b肽奠定基础。
Abstract:
-

参考文献/References:

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相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2021-09-16
基金项目：湖北省教育厅科研项目(编号：Q20172704)。
作者简介：黄欣媛(1985—)，女，湖北孝感人，博士，讲师，主要从事生物活性多肽的作用机制研究。E-mail：huangxy5885@163.com。
更新日期/Last Update: 2022-08-05