[1]邱曦锦,方绍兴,杨宇,等.水稻白叶枯病菌实时荧光定量PCR检测体系的建立及在防效评价中的应用[J].江苏农业科学,2025,53(10):145-152.
　Qiu Xijin,et al.Establishment of realtime fluorescence quantitative PCR detection system for Xanthomonas oryzae pv. oryzae and its application in control effect evaluation[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2025,53(10):145-152.
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水稻白叶枯病菌实时荧光定量PCR检测体系的建立及在防效评价中的应用()

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第53卷
期数:
2025年第10期
页码:
145-152
栏目:
植物保护
出版日期:
2025-05-20

文章信息/Info

Title:
Establishment of realtime fluorescence quantitative PCR detection system for Xanthomonas oryzae pv. oryzae and its application in control effect evaluation
作者:
邱曦锦1; 2; 方绍兴1; 杨宇1; 高顺玉1; 王振吉1; 阮文忠3; 段浩平4; 姚春5; 姬广海2; 杨俊1
1.楚雄师范学院资源环境与化学学院，云南楚雄 675000； 2.云南农业大学植物保护学院，云南昆明 650201； 3.楚雄彝族自治州农业科学院，云南楚雄 675000； 4.保山市农业科学研究院，云南保山 678000； 5.禄丰市中村乡农兴农业机械专业合作社，云南 楚雄 651299
Author(s):
Qiu Xijin; et al
关键词:
水稻; 白叶枯病; 实时荧光定量PCR; 定量检测; 防效评价
Keywords:
-
分类号:
S435.111.4+7
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
水稻白叶枯病是引起水稻减产的主要病害之一，为了监测施用防治药剂后水稻叶片中白叶枯病病菌的含量，以评价防治效果，基于已完成基因组测序的水稻白叶枯病病菌(Xoo)糖基转移酶基因设计引物，构建实时荧光定量PCR(qPCR)技术，并对温室开展的防治白叶枯病的药效试验开展评价。基于糖基转移酶基因设计特异性引物，以按梯度浓度(10-5~10 ng/μL)稀释的Xoo DNA作为标准品进行扩增。结果表明，通过常规PCR扩增得到的目的基因条带大小为230 bp，Xoo DNA检测的灵敏度为1.43×101 pg/μL；qPCR检测Xoo DNA的灵敏度为2.5 pg/μL。研究结果表明，qPCR的灵敏度比常规PCR高10倍左右，且标准曲线为y=-2.579 3x+43.946 0，r2=0.999 9。进一步利用qPCR技术对温室药效试验后的水稻叶片进行Xoo的定量分析，发现定量后叶片中的Xoo拷贝数与叶片病情指数成正相关，与温室防治效果结果一致。研究得出的qPCR技术的温室防效评价可为后续水稻白叶枯病的防治效果评价提供技术支持。
Abstract:
-

参考文献/References:

［1］莫俊杰，胡嘉欣，林雄健，等. 水稻收获指数与产量形成主要性状的相关性研究［J］. 杂交水稻，2023，38(2)：32-37.
［2］章秀福，王丹英，方福平，等. 中国粮食安全和水稻生产［J］. 农业现代化研究，2005，26(2)：85-88.
［3］张健男，王依名，张洁净，等. 利用实时荧光定量PCR和数字PCR检测鉴定水稻细菌性条斑病菌［J］. 浙江大学学报(农业与生命科学版)，2023，49(1)：55-64.
［4］Lu J L，Li Q L，Wang C C，et al. Identification of quantitative trait loci associated with resistance to Xanthomonas oryzae pv.oryzae pathotypes prevalent in South China［J］. The Crop Journal，2022，10(2)：498-507.
［5］王华弟，陈剑平，严成其，等. 中国南方水稻白叶枯病发生流行动态与绿色防控技术［J］. 浙江农业学报，2017，29(12)：2051-2059.
［6］张芬. 水稻稻瘟病和白叶枯病拮抗细菌的筛选及防治作用研究［D］. 南京：南京农业大学，2011.
［7］王剑，朱燕，赵黎宇，等. 水稻白叶枯病的发生流行与防治技术［J］. 四川农业科技，2020(10)：35-36，39.
［8］刘巍. 东北地区粳稻白叶枯病菌生理分化及水稻品种对9号小种抗性研究［D］. 长春：吉林农业大学，2015.
［9］李树江，张韵霞，刘羽，等. 辣椒根腐病生防菌的筛选鉴定及生防作用［J］. 中国蔬菜，2023(9)：69-76.
［10］张浩，张荣胜，齐中强，等. 生防菌解淀粉芽孢杆菌Lx-11悬乳剂研制及其对水稻白叶枯病的防治效果评价［J］. 中国生物防治学报，2022，38(2)：393-403.
［11］张杰. 水稻健康叶片与白叶枯病叶内生微生物群落分析和白叶枯病菌南方菌株生理小种和分子型鉴定［D］. 北京：中国农业科学院，2019.
［12］吴水祥，徐抗冬，狄蕊，等. 几种药剂防治水稻白叶枯病效果试验［J］. 湖北植保，2022(2)：38-40.
［13］侯雨萱，于林，李阳，等. 16种杀菌剂对3种水稻病原细菌的室内抑菌效果研究［J］. 中国稻米，2023，29(6)：28-32.
［14］李云飞. 水稻黄单胞菌的检测方法研究［D］. 合肥：安徽农业大学，2013.
［15］廖晓兰，朱水芳，赵文军，等. 水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌的实时荧光PCR快速检测鉴定［J］. 微生物学报，2003，43(5)：626-634.
［16］许忠祥，杨静，刘晓宇，等. 大豆南方茎溃疡病菌PCR检测方法的建立［J］. 植物检疫，2022，36(5)：34-40.
［17］李月，张志标，周玉蓉，等. 梅州地区柑橘黄龙病的常规PCR与实时荧光定量PCR检测技术研究与应用［J］. 现代农业科技，2020(8)：103-105.
［18］唐梦君，周倩，张小燕，等. 3种分子生物学方法检测金黄色葡萄球菌的比较研究［J］. 食品安全质量检测学报，2016，7(6)：2247-2251.
［19］Lu W，Pan L Q，Zhao H J，et al. Molecular detection of Xanthomonas oryzae pv.oryzae，Xanthomonas oryzae pv.oryzicola，and Burkholderia glumae in infected rice seeds and leaves［J］. The Crop Journal，2014，2(6)：398-406.
［20］de Chaves M Q，Morán F，Barbé S，et al. A new and accurate qPCR protocol to detect plant pathogenic bacteria of the genus ‘Candidatus Liberibacter’in plants and insects［J］. Scientific Reports，2023，13(1)：3338.
［21］唐利华，郭堂勋，李其利，等. 实时荧光定量PCR检测柑橘黄龙病田间试验药剂防治效果［J］. 安徽农业科学，2018，46(24)：128-129，159.
［22］王淑芳，马桂珍，李世东，等. 应用实时荧光定量技术评价粉红粘帚霉对水稻纹枯病的田间防治效果［J］. 植物病理学报，2014，44(4)：422-427.
［23］王吉成，李洁，丁天波，等. 番茄褪绿病毒TaqMan荧光定量PCR快速检测方法的建立与应用［J］. 昆虫学报，2020，63(2)：159-165.
［24］张荣胜，戴秀华，陈志谊. 解淀粉芽孢杆菌Lx-11对水稻细菌性条斑病的防治效果［J］. 江苏农业科学，2014，42(10)：115-116.
［25］谭小艳，马耀华，郝兆祥. 4种改良CTAB法提取石榴成熟叶片DNA的比较研究［J］. 中国南方果树，2021，50(3)：122-125.
［26］李文学，肖瑞刚，吕苗苗，等. 葡萄霜霉病菌实时荧光定量PCR检测体系的建立和应用［J］. 中国农业科学，2019，52(9)：1529-1540.
［27］孟鸿洲. 湖北省水稻白叶枯菌的小种组成及定量检测体系的建立［D］. 武汉：华中农业大学，2015.
［28］韩阳，张丽辉，王永吉，等. 水稻细菌性条斑病菌的实时荧光PCR检测技术研究［J］. 云南农业大学学报(自然科学)，2012，27(3)：315-320.

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[11]俞咪娜,于俊杰,尹小乐,等.2013年江苏省水稻区试品种抗细菌性病害的鉴定和评价[J].江苏农业科学,2014,42(08):109.
　Yu Mina,et al.Identification and evaluation of bacterial diseases resistance of rice varieties for regional test in Jiangsu Province in 2013[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(10):109.
[12]张世玺,姚坚,杨海龙,等.聚合抗稻瘟病基因Pia和抗白叶枯病基因Xa23的广亲和恢复系选育[J].江苏农业科学,2024,52(11):111.
　Zhang Shixi,et al.Breeding of a wide compatibility restorer line polymerizing blast resistance gene Pia and bacterial blight resistance gene Xa23[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2024,52(10):111.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2024-04-21
基金项目：云南省应用基础研究计划青年项目(编号：202201AU070194)；云南省基础研究计划地方高校联合专项-面上项目(编号：20221109144315)；云南农业大学国家重点实验室一般项目(编号：gzkf2022005)；云南省基础研究计划基础研究专项面上项目(编号：202401AT070301)；乡村振兴科技专项-服务型科技特派员(编号：202304BK090504)；楚雄师范学院校级科研课题(编号：XSKY2303)；2024楚雄师范学院校级科研团队建设项目(编号：B05)；第九届全国大学生生命科学竞赛(科学探究类)(编号：910389)。
作者简介：邱曦锦(1999—)，女，云南曲靖人，硕士研究生，从事植物保护研究。E-mail：1178087485@ qq.com。
通信作者：姬广海，教授，主要从事植物细菌病害方面的研究，E-mail：550356818@qq.com；杨俊，博士，副教授，主要从事植物细菌病害方面的研究，E-mail：yangjun@cxtc.edu.cn。
更新日期/Last Update: 2025-05-20