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[1]李旭艳,邵淑丽,张伟伟,等.质粒介导的RNAi沉默 mdr1基因增强白血病耐药细胞HT9对姜黄素的敏感性[J].江苏农业科学,2014,42(01):22-25.
　Li Xuyan,et al.Sensitivity enhancement of drug-resistant leukemia HT9 cells to curcumin by plasmid-mediated RNAi mdr1 gene[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(01):22-25.
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质粒介导的RNAi沉默 mdr1基因增强白血病
耐药细胞HT9对姜黄素的敏感性(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第42卷
期数:
2014年01期
页码:
22-25
栏目:
生物技术
出版日期:
2014-01-25

文章信息/Info

Title:
Sensitivity enhancement of drug-resistant leukemia HT9 cells to curcumin by plasmid-mediated RNAi mdr1 gene
作者:
李旭艳;  邵淑丽;  张伟伟;  恽东泽;  付博;  张珍珠
齐齐哈尔大学，黑龙江齐齐哈尔 161006
Author(s):
Li Xuyan; et al
关键词:
shRNA; pSilencer 2.1-U6 neo质粒; 多药耐药性; HT9细胞; 姜黄素
Keywords:
-
分类号:
R961
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
通过pSilencer 2.1质粒介导的RNAi技术沉默急性早幼粒白血病耐药HT9细胞的耐药基因mdr1表达，可提高耐药细胞对姜黄素的敏感性。通过设计合成靶向mdr1基因的shRNA干扰片段，定向克隆到pSilencer 2.1-U6 neo质粒中，成功构建沉默mdr1基因特异表达的shRNA表达载体，电转染HT9细胞后筛选阳性克隆扩大培养。采用实时荧光定量PCR、Western blot检测细胞mdr1基因表达情况，流式细胞术检测P-糖蛋白外排泵功能，MTT法和流式细胞技术检测细胞对药物敏感性和细胞周期分布。结果显示，构建的shRNA表达载体pU6/shRNA/mdr1转染HT9细胞后，HT9/pU6/shRNA细胞mdr1 mRNA表达降低了78.84%(P<0.01)，P-糖蛋白的表达量降低了48.27%(P<0.05)，细胞内Rho123相对荧光强度由10.8%±058%升高至73.56%±1.37%；转染细胞对姜黄素敏感性明显增强，IC50由(24.10±0. 83) μmol/L降至(5.10±014) μmol/L；耐药相对逆转率为84.74%±1.86%，与HT9细胞相比，经姜黄素处理的稳定转染细胞HT9/pU6/shRNA细胞周期阻滞在S、G2/M期。说明质粒介导的shRNA表达载体pU6/shRNA/mdr1能够稳定、持久地抑制mdr1基因表达，能有效增强HT9细胞对姜黄素的敏感性。
Abstract:
-

参考文献/References:

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相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2013-06-06
基金项目：黑龙江省自然科学基金(编号：C200624)；黑龙江省教育厅科技项目(编号：11511447、12511611)。
作者简介：李旭艳(1982—)，女，山东阳谷人，硕士，讲师，从事分子生物学研究。Tel：(0452)2742695；E-mail：lxy0702@126.com。
通信作者：邵淑丽，博士，教授，从事分子生物学研究。Tel：(0452)2738219；E-mail：shshl32@163.com。
更新日期/Last Update: 2014-01-25