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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第43卷

期数:

2015年01期

页码:

44-46

栏目:

生物技术

出版日期:

2015-01-25

文章信息/Info

Title:

Comparison and optimization of extraction method of total RNA from Thesium chinense root system

作者:

刘波;  张晓明;  郭巧生;  王长林

南京农业大学中药材研究所，江苏南京 210095

Author(s):

Liu Bo; et al

关键词:

百蕊草; 总RNA提取; 多糖; 多酚; TRIzol法; RT-PCR

Keywords:

-

分类号:

Q522

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

百蕊草根系富含多糖、多酚和其他次生代谢产物，用传统方法提取总RNA难以有效将这些杂质去除。以百蕊草根系为材料，比较TRIzol法、CTAB-LiCl法、SDS/酚法及改进TRIzol法4种方法对百蕊草根系总RNA的提取效果，并以电泳检测、D₂60 nm/D₂80 nm比值测定、RT-PCR试验等对结果进行分析评价。结果表明，4种方法均能提取百蕊草根中总RNA，提取效果差异显著；改进TRIzol法提取总RNA的28S和18S条带清晰，无弥散，28S亮度比18S加倍，完整性好，无明显DNA或其他杂质污染，D₂60 nm/D₂80 nm值为1.8～2.0，D₂60 nm/D₂30 nm值大于2.0，总RNA得率仅次于TRIzol法；用改进TRIzol法提取总RNA，反转录cDNA片段大小分布在0.2～2.5 kb，可扩增出目的基因片段，提取的总RNA完全适用于后续的分子生物学研究。

Abstract:

-

参考文献/References:

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相似文献/References:

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　Li Xiaoting,et al.Comparative study on extraction methods of total RNA from Hippophae rhamnoides[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(01):33.

备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2014-03-25
基金项目：国家自然科学基金(编号：81202867)。
作者简介：刘波(1989—)，男，浙江衢州人，硕士，主要从事药用植物栽培生理研究。E-mail：2011104175@njau.edu.cn。
通信作者：郭巧生，博士，教授，主要从事药用植物资源开发。E-mail：gqs@njau.edu.cn。

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更新日期/Last Update: 2015-01-25