|本期目录/Table of Contents|

[1]王平,赵巧巧,黄鹰.丙酮醛降解酶基因的克隆与高效表达[J].江苏农业科学,2016,44(02):62-65.
　Wang Ping,et al.Cloning and effective expression of methylglyoxal degradation enzyme gene[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2016,44(02):62-65.
点击复制

丙酮醛降解酶基因的克隆与高效表达(PDF)
分享到：

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第44卷
期数:
2016年02期
页码:
62-65
栏目:
生物技术
出版日期:
2016-02-25

文章信息/Info

Title:
Cloning and effective expression of methylglyoxal degradation enzyme gene
作者:
王平1;  赵巧巧1; 2;  黄鹰1
1.南京师范大学生命科学学院，江苏南京 210046；2.邹平第一中学，山东滨州 256200
Author(s):
Wang Ping; et al
关键词:
粟酒裂殖酵母; 丙酮醛降解酶; 丙酮醛; 基因克隆; 基因表达
Keywords:
-
分类号:
Q785
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
由于丙酮醛降解酶(methylglyoxal degradation enzyme，MD)是生物体内代谢丙酮醛的一种关键酶，实现MD的高效表达对调控丙酮醛的代谢途径具有重要意义。所以根据Schizosaccharomyces pombe_GeneDB中MD的基因序列(SPAC22E12.03C)设计引物，以粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe )cDNA文库为模板通过PCR扩增技术得到目标基因，目的片段全长576 bp。将SPAC22E12.03C连接到pET-28a(+)上，得到重组质粒pET-28a(+)-SPAC22E12.03C，并在Escherichia coli BL2l(DE3)中实现表达。同时，对其目的蛋白的表达条件进行了优化，获得最佳表达条件：诱导温度37 ℃，诱导起始菌体D600 nm为0.5~0.6，诱导剂IPTG浓度为0.8 mmol/L。这为研究粟酒裂殖酵母体内丙酮醛的降解途径打下了坚实基础。
Abstract:
-

参考文献/References:

［1］Thornalley P J，Langborg A，Minhas H S. Formation of glyoxal，methylglyoxal and 3-deoxyglucosone in the glycation of proteins by glucose［J］. Biochemical Journal，1999，344(1)：109-116.
［2］刘学伟，杨克，张杰. 丙酮醛对人牙周膜成纤维细胞的毒性作用［J］. 云南大学学报：自然科学版，2006，28(增刊1)：393-395.
［3］Murata-Kamiya N，Methylglyoxal K H，Aldehyde A E. Crosslinks DNA polymerase and the substrate DNA［J］. Nucleic Acids Research，2001，29(16)：3433-3438.
［4］Ferguson G P，Ttemeyer S，Maclean M J，et al. Methylglyoxal production in bacteria：suicide or survival？［J］. Archives of Microbiology，1998，170(4)：209-218.
［5］Ward R A，Mcleish K R. Methylglyoxal：a stimulus to neutrophil Oxygen radical production in chronic renal failure？［J］. Nephrology Dialysis Transplantation，2004，19(7)：1702-1707.
［6］Okado A，Kawasaki Y，Hasuike Y，et al. Induction of apoptotic cell death by methylglyoxal and 3-deoxyglucosone in macrophage-derived cell lines［J］. Biochemical and Biophysical Research Communications，1996，225(1)：219-224.
［7］Mclellan A C，Thornalley P J，Benn J，et al. Glyoxalase system in clinical diabetes mellitus and correlation with diabetic complications［J］. Clinical Science，1994，87(1)：21-29.
［8］Ahmed N，Babaei-Jadidi R，Howell S K，et al. Degradation products of proteins damaged by glycation，oxidation and nitration in clinical type 1 diabetes［J］. Diabetologia，2005，48(8)：1590-1603.
［9］Thornalley P J. The glyoxalase system：new developments towards functional characterization of a metabolic pathway fundamental to biological Life［J］. Biochemical Journal，1990，269(1)：1-11.
［10］van der Jagt D L，Robinson B，Taylor K K，et al. Reduction of trioses by NADPH-dependent aldo-keto reductases. Aldose reductase，methylglyoxal，and diabetic complications［J］. The Journal of Biological Chemistry，1992，267(7)：4364-4369.
［11］Lee J Y，Song J，Kwon K，et al. Human DJ-1 and its homologs are novel glyoxalases［J］. Human Molecular Genetics，2012，21(14)：3215-3225.
［12］Sorensen H P，Mortensen K K. Soluble expression of recombinant proteins in the cytoplasm of Escherichia coli［J］.Microbial Cell Factories，2005，4(1)：1.
［13］Williams R E，Bruce N C. ‘New uses for an old enzyme’—the old yellow enzyme family of flavoenzymes［J］. Microbiology，2002，148(Pt 6)：1607-1614.
［14］冯志国，刘慧娟，陆婕，等. 一新富含甘氨酸果蝇抗菌肽在大肠杆菌中的优化表达［J］. 生物技术，2008，18(4)：18-20.
［15］Xu Z，Peng L，Zhong Z，et al. High-level expression of a soluble functional antimicrobial peptide，human beta-defensin 2，in Escherichia coli［J］. Biotechnology Progress，2006，22(2)：382-386.

相似文献/References:

[1]苏明慧,汪一荣,杨艳梅,等.细胞色素C氧化酶亚基Cox4的克隆及高效表达[J].江苏农业科学,2018,46(15):31.
　Su Minghui,et al.Cloning and effective expression of cytochrome C oxidase subunit Cox4[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2018,46(02):31.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2015-03-24
基金项目：国家自然科学基金(编号：31070703) 。
作者简介：王平(1990—)，女，河南南阳人，硕士研究生，从事粟酒裂殖酵母分子机理研究。E-mail：350479708@qq.com。
通信作者：黄鹰，教授，从事微生物生物化学与分子生物学研究。E-mail：paula_wong@163.com。
更新日期/Last Update: 2016-02-25