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[1]高宝德,张晓丽,刘海燕,等.盘羊杂交羊SPLUNC1融合蛋白的真核表达[J].江苏农业科学,2017,45(14):130-133.
　Gao Baode,et al.Eukaryotic expression of argali hybrid sheep SPLUNC1 fusion protein[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2017,45(14):130-133.
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盘羊杂交羊SPLUNC1融合蛋白的真核表达(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第45卷
期数:
2017年14期
页码:
130-133
栏目:
畜牧兽医与水产蚕桑
出版日期:
2017-07-20

文章信息/Info

Title:
Eukaryotic expression of argali hybrid sheep SPLUNC1 fusion protein
作者:
高宝德1;  张晓丽2;  刘海燕2;  张彦兵1;  孙延鸣2
1.石河子大学生命科学学院，新疆石河子 832003； 2.石河子大学动物科技学院，新疆石河子 832003
Author(s):
Gao Baode; et al
关键词:
盘羊杂交羊; 短颚、肺及鼻咽上皮细胞克隆1; 融合蛋白; 真核表达
Keywords:
-
分类号:
Q786
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
为构建盘羊杂交羊SPLUNC1基因的真核表达载体并在巴斯德毕赤酵母中表达，从盘羊杂交羊口腔上颚的上皮细胞中提取总RNA，并反转录成cDNA，以该cDNA为模板采用逆转录PCR(RT-PCR)法克隆盘羊杂交羊SPLUNC1基因开放阅读框，并克隆到pPIC9K载体中，构建真核表达载体pPIC9K-SPLUNC1，再将重组质粒电转至毕赤酵母GS115中进行表达，表达产物经Ni-NTA琼脂亲和层析纯化，并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western Blot)方法检测。结果显示，目的基因大小758 bp，重组表达质粒pPIC9K-SPLUNC1经双酶切、PCR及测序鉴定构建成功；表达产物经SDS-PAGE分析，可见大小为25.96 ku的目的条带，且在72 h表达量最大；纯化后经SDS-PAGE和Western Blot分析，可见大小为25.96 ku的目的条带。研究结果表明，利用真核表达系统在体外成功表达并纯化了盘羊杂交羊rSPLUNC1蛋白，为深入研究盘羊杂交羊SPLUNC1蛋白的生物学功能奠定基础。
Abstract:
-

参考文献/References:

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相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2016-03-21
基金项目：国家自然科学基金(编号：31460686)。
作者简介：高宝德(1988—)，男，甘肃白银人，硕士，研究方向为动物学。E-mail：1369820915@qq.com。
通信作者：孙延鸣，博士，教授，主要研究方向为临床兽医学。E-mail：sym@shzu.edu.cn。
更新日期/Last Update: 2017-07-20