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[1]朱佳慧,徐秋芳,袁平平,等.水稻幼苗酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定[J].江苏农业科学,2018,46(09):47-50.
　Zhu Jiahui,et al.Construction and identification of yeast two hybrid cDNA library from rice seedling[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2018,46(09):47-50.
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水稻幼苗酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第46卷
期数:
2018年09期
页码:
47-50
栏目:
生物技术
出版日期:
2018-05-05

文章信息/Info

Title:
Construction and identification of yeast two hybrid cDNA library from rice seedling
作者:
朱佳慧1; 2;  徐秋芳2;  袁平平1; 3;  倪海平2;  周益军2;  蒋选利3;  杜何为1
1.长江大学生命科学学院，湖北荆州 434025； 2.江苏省农业科学院植物保护研究所，江苏南京 210014；
3.贵州大学农学院，贵州贵阳 550025
Author(s):
Zhu Jiahui; et al
关键词:
水稻; 幼苗cDNA文库; 酵母双杂交; 水稻黑条矮缩病毒; 滴度; 库容; 重组率
Keywords:
-
分类号:
S435.111.4+9；Q943.2
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
为解析水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)与寄主水稻的互作机制，筛选水稻中与病毒互作的蛋白，以易感RBSDV的水稻品种日本晴3~4叶期的组织样品为材料，通过提取总RNA后分离获得mRNA，合成cDNA双链后连入pDONR222载体，获得初级文库。初级文库的滴度为6.6×106 CFU/mL，库容为1.9×107 CFU，重组率>95%，插入片段平均长度>1 kb。提取初级文库质粒，通过重组反应将水稻cDNA文库转移至pGADT7-DEST载体，构建获得水稻幼苗的酵母双杂交cDNA文库，文库的滴度为4.5×106 CFU/mL，库容为1.3×107 CFU，重组率>95%，cDNA插入片段平均长度>1 kb。采用RBSDV候选基因进行文库筛选，结果表明所构建的酵母文库可用于筛选病毒互作蛋白。
Abstract:
-

参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2018-01-08
基金项目：国家自然科学基金(编号：31471768)；江苏省农业科技自主创新资金［编号：CX(15)1053］。
作者简介：朱佳慧(1992—)，女，湖北孝昌人，硕士研究生，从事植物病毒学研究。E-mail：942336014@qq.com。
通信作者：杜何为，博士，教授，从事玉米耐渍性形成分子机制的研究。E-mail：duhewei666@163.com。
更新日期/Last Update: 2018-05-05