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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第46卷

期数:

2018年10期

页码:

28-30

栏目:

生物技术

出版日期:

2018-05-20

文章信息/Info

Title:

Construction and application of InDel-PCR system of dry pepper

作者:

王辉;  王爽;  姜童;  杨延杰;  林多

青岛农业大学园艺学院/青岛市遗传改良与育种重点实验室，山东青岛 266109

Author(s):

Wang Hui; et al

关键词:

干制辣椒; InDel-PCR; InDel引物

Keywords:

-

分类号:

S641.301

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

以干制辣椒叶片为试验材料，筛选适用于InDel-PCR(insertion-deletion-PCR)的DNA提取方法。采用单因素试验设计，对干制辣椒InDel-PCR反应体系进行优化，以及建立干制辣椒InDel的最佳反应体系和扩增程序，利用构建的InDel-PCR反应体系对InDel引物进行筛选。结果表明：植物基因组试剂盒较改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取的DNA质量高、杂质少，更适合InDel-PCR的应用；适用于干制辣椒的InDel-PCR反应体系总体积为15 μL，其中模板DNA 2.0 μL，正反向引物各1.0 μL，2×Go Taq R Colorless Master Mix 7.5 μL，其余用ddH₂O补齐。扩增程序：94 ℃预变性5 min；94 ℃变性30 s，56 ℃退火30 s，72 ℃延伸45 s，30次循环；72 ℃延伸5 min。在上述PCR条件下从60对InDel引物中筛选出25对多态性好、稳定性高的引物。

Abstract:

-

参考文献/References:

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相似文献/References:

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　Li Huiling,et al.Optimization and primer screening of InDel-PCR reaction system for pigment pepper[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2021,49(10):72.

备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2016-12-05
基金项目：山东省农业良种工程(编号：2016LZGC011)；青岛农业大学高层次人才科研基金(编号：6631115041)。
作者简介：王辉(1981—)，男，山东菏泽人，博士，讲师，主要研究方向为蔬菜遗传育种与分子生物学。E-mail：fromstick@163.com。
通信作者：林多，博士，教授，主要研究方向为蔬菜营养生理与品质育种。E-mail：linduo73@163.com。

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更新日期/Last Update: 2018-05-20