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[1]路遥,周东,郑银英.加工番茄PVYN：O HC-Pro、STV RdRp酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活验证[J].江苏农业科学,2018,46(17):49-52.
　Lu Yao,et al.Construction and identification of bait vector containing PVYN：O HC-Pro、STV RdRp gene in yeast two-hybrid system of processing tomatoes[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2018,46(17):49-52.
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加工番茄PVYN：O HC-Pro、STV RdRp酵母双杂交
诱饵载体的构建及自激活验证(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第46卷
期数:
2018年第17期
页码:
49-52
栏目:
生物技术
出版日期:
2018-09-05

文章信息/Info

Title:
Construction and identification of bait vector containing PVYN：O HC-Pro、STV RdRp gene in yeast two-hybrid system of processing tomatoes
作者:
路遥;  周东;  郑银英
石河子大学生命科学学院/石河子大学农业生物技术重点实验室，新疆石河子 832003
Author(s):
Lu Yao; et al
关键词:
加工番茄; PVY; STV; 酵母双杂交; 自激活; 诱饵载体
Keywords:
-
分类号:
S641.201
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
马铃薯Y病毒（potato virus Y，简称PVY）和南方番茄病毒（southern tomato virus，简称STV）是加工番茄上非常普遍的病毒，以从加工番茄cDNA文库中筛选与病毒功能蛋白互作的基因为目标，构建PVY HC-Pro、STV RdRp Cyto Trap酵母双杂交诱饵载体，为抗病基因的筛选工作奠定基础。通过PCR技术，扩增PVY HC-Pro、STV RdRp片段分别克隆到诱饵载体pSos，用酶切、测序结果正确的2个诱饵载体重组质粒转化酵母感受态cdc25H，进行自激活检测及毒性验证。将不同组合的酵母转化液涂布于SD/Glu(-UL)培养基（SD/Glu指含有葡萄糖的SD培养基，-UL指缺失尿嘧啶、亮氨酸2种氨基酸）平板上，于25 ℃培养4 d后，挑取3个单菌落分别划线于2个SD/Glu(-UL)和2个SD/Gal(-UL)培养基上，并分别置于25、37 ℃继续培养5 d。结果表明，在25 ℃培养条件下，SD/Glu(-UL)和SD/Gal(-UL)培养基上酵母菌生长正常；在37 ℃培养条件下，SD/Glu(-UL)培养基上无酵母菌的生长，SD/Gal(-UL) 培养基上阳性组合酵母生长正常，阴性组合酵母均不生长。构建的pSos-HC-Pro、pSos-RdRp诱饵载体没有转录自激活活性和毒害作用，可用于Cyto Trap酵母双杂交系统。
Abstract:
-

参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2017-04-11
基金项目：国家自然科学基金(编号：31460466)。
作者简介：路遥(1991—)，男，新疆五家渠人，硕士研究生，主要从事植物基因工程研究。E-mail：1601404971@qq.com。
通信作者：郑银英，博士，副教授，主要从事植物病毒学与植物分子遗传学研究。E-mail：69825983@qq.com。
更新日期/Last Update: 2018-09-05