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[1]刘希,李远凤,齐亚飞,等.拟南芥自噬蛋白ATG8e的原核表达及多克隆抗体制备[J].江苏农业科学,2018,46(18):47-51.
　Liu Xi,et al.Prokaryotic expression and polyclonal antibodies preparation for Arabidopsis thaliana autophagy protein ATG8e[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2018,46(18):47-51.
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拟南芥自噬蛋白ATG8e的原核表达及多克隆抗体制备(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第46卷
期数:
2018年第18期
页码:
47-51
栏目:
生物技术
出版日期:
2018-09-20

文章信息/Info

Title:
Prokaryotic expression and polyclonal antibodies preparation for Arabidopsis thaliana autophagy protein ATG8e
作者:
刘希;  李远凤;  齐亚飞;  郁飞
旱区逆境生物学国家重点实验室/西北农林科技大学生命科学学院，陕西杨凌 712100
Author(s):
Liu Xi; et al
关键词:
自噬蛋白; ATG8e; 蛋白纯化; 多克隆抗体制备; 免疫印迹
Keywords:
-
分类号:
Q943
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
构建拟南芥自噬相关基因ATG8e的原核表达载体pGEX-4T-1-ATG8e，转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株，并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导得到融合蛋白GST-ATG8e。GST-ATG8e蛋白首先用谷胱甘肽琼脂糖凝胶树脂亲和纯化，然后用凝血酶酶切去除谷胱甘肽S移换酶(glutathione S-transferase，简称GST）标签，最后十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，简称SDS-PAGE）割胶纯化，用纯化后14 ku的ATG8e蛋白免疫家兔4次得到抗血清，纯化抗血清制备高效ATG8e多克隆抗体。提取野生型拟南芥和ATG8e超表达植株叶片总蛋白做免疫印迹检测，结果在2种基因型植物叶片蛋白样品中均能检测到与ATG8e分子量大小一致的条带，且ATG8e超表达植物中ATG8e积累量明显高于野生型。成功制备了拟南芥ATG8e蛋白多克隆抗体，为研究ATG8e在自噬中的作用奠定了试验基础。
Abstract:
-

参考文献/References:

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相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2017-03-26
基金项目：陕西省自然科学基金(编号：2015JM3081)。
作者简介：刘希(1991—)，女，陕西汉中人，硕士，主要从事植物分子遗传学研究。E-mail：1468538509@qq.com。
通信作者：郁飞，博士，教授，博士生导师，主要从事植物分子遗传学研究。E-mail：flyfeiyu@gmail.com。
更新日期/Last Update: 2018-09-20