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[1]谢琮琮,许文武,李至敏,等.蓝杆藻ATCC 51142中α-酮戊二酸脱羧酶的克隆与表达[J].江苏农业科学,2018,46(19):37-39.
　Xie Congcong,et al.Cloning and expression of α-ketoglutarate decarboxylase from Cyanothece sp. ATCC 51142[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2018,46(19):37-39.
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蓝杆藻ATCC 51142中α-酮戊二酸脱羧酶
的克隆与表达(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第46卷
期数:
2018年第19期
页码:
37-39
栏目:
生物技术
出版日期:
2018-10-05

文章信息/Info

Title:
Cloning and expression of α-ketoglutarate decarboxylase from Cyanothece sp. ATCC 51142
作者:
谢琮琮1;  许文武1;  李至敏2;  王小琴1;  雷国风1;  张伟1;  黄婷1;  李志敏1
1.江西农业大学生物科学与工程学院，江西南昌 330045； 2.江西农业大学理学院，江西南昌 330045
Author(s):
Xie Congcong; et al
关键词:
蓝杆藻ATCC 51142; α-酮戊二酸脱羧酶; 基因克隆; 重组表达; 蛋白质纯化
Keywords:
-
分类号:
S188
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
α-酮戊二酸脱羧酶催化α-酮戊二酸的非氧化脱羧生成琥珀酸半醛，其在琥珀酸半醛脱氢酶的作用下转化为琥珀酸，蓝藻的三羧酸循环由于这2个酶的存在而变得完整。Blast序列分析发现，蓝杆藻ATCC 51142中cce4227基因编码α-酮戊二酸脱羧酶。为了证实cce4227基因编码蛋白的催化功能，从蓝杆藻ATCC 51142基因组中克隆cce4227基因，然后构建pET28a-cce4227表达质粒。将该质粒与pTf16分子伴侣质粒共转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞后进行重组蛋白的诱导表达。利用镍亲和层析方法对cce4227蛋白进行分离纯化，得到纯度>95%的cce4227蛋白，菌体蛋白收率约为12 mg/g。酶动力学测试表明，cce4227蛋白是1个焦磷酸硫胺素(TPP)依赖型的α-酮戊二酸脱羧酶。
Abstract:
-

参考文献/References:

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相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2018-02-08
基金项目：国家自然科学基金(编号：31560250、31400054)；江西省自然科学基金重大项目(编号：20161ACB21012)；江西省教育厅科技研究重点项目(编号：GJJ160353)；江西农业大学国家级大学生创新创业训练项目(编号：201710410005)。
作者简介：谢琮琮(1993—)，女，江西赣州人，硕士研究生，主要从事生物化学与分子生物学研究。E-mail：1547368064@qq.com。
通信作者：李志敏，博士，副教授
更新日期/Last Update: 2018-10-05