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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第46卷

期数:

2018年第21期

页码:

96-98

栏目:

植物保护

出版日期:

2018-11-05

文章信息/Info

Title:

One-step reverse transcription recombinase polymerase amplification (RT-RPA) technology for detection of BPMV

作者:

张永江¹;  魏霜²;  袁俊杰³;  乾义柯⁴;  李桂芬¹;  魏梅生¹

1.中国检验检疫科学研究院，北京 100176； 2.广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心，广东广州 510632；
3.湛江出入境检验检疫局，广东湛江 524000； 4.伊犁出入境检验检疫局，新疆伊宁 835221

Author(s):

Zhang Yongjiang; et al

关键词:

菜豆荚斑驳病毒; RT-RPA检测; 植物检疫

Keywords:

-

分类号:

Q78

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

菜豆荚斑驳病毒(bean pod mottle virus，简称BPMV)是我国进境植物检疫性有害生物，建立快速灵敏的一步法逆转录重组酶聚合酶扩增(reverse transcription-recombinase polymerase amplification，简称RT-RPA)技术用于对BPMV的检测。根据BPMV基因组的保守序列，设计重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification，简称RPA)技术特异性引物，对BPMV、南方菜豆花叶病毒(southern bean mosaic virus，简称SBMV)、大豆花叶病毒(soybean mosaic virus，简称SMV)、南芥菜花叶病毒(arabis mosaic virus，简称ArMV)及烟草环斑病毒(tobacco ringspot virus，简称TRSV)共5种病毒进行RT-RPA特异性验证；并设计5个模板浓度梯度，以验证RT-RPA方法的灵敏性。结果表明，建立的RT-RPA检测方法能够从BPMV样品中检测到198 bp的特异性条带，且仅需在40 ℃下恒温反应40 min，不需要特殊的仪器设备；特异性验证试验表明，除BPMV能检测到特异性条带外，其他4种病毒SBMV、SMV、ArMV、TRSV均未检测到特异性条带，证明该方法特异性好；RT-RPA检测BPMV的灵敏度达到10^-4稀释度，说明所建立的RT-RPA方法灵敏性高。综上所述，建立的RT-RPA方法检测BPMV特异性强、灵敏度高，无需特殊的仪器设备，适合实验室或者现场快速检测。

Abstract:

-

参考文献/References:

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相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2017-07-01
基金项目：国家重点研发计划(编号：2016YFF0203200)；广东出入境检验检疫局科技计划(编号：2017GDK76)。
作者简介：张永江(1977—)，男，山东潍坊人，博士，研究员，主要从事植物病毒检测研究。E-mail：zhangyjpvi@yeah.net。

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更新日期/Last Update: 2018-11-05