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[1]仵陶,安胜军,邵铁梅,等.微型人胰岛素基因载体的构建及其在花生中的表达[J].江苏农业科学,2019,47(04):42-46.
 Wu Tao,et al.Construction and expression of mini human insulin vector in peanuts[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2019,47(04):42-46.
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微型人胰岛素基因载体的构建及其在花生中的表达(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第47卷
期数:
2019年第04期
页码:
42-46
栏目:
生物技术
出版日期:
2019-03-15

文章信息/Info

Title:
Construction and expression of mini human insulin vector in peanuts
作者:
仵陶1 安胜军2 邵铁梅1 朱正歌3 焦展1 刘培1 李雪1
1.河北化工医药职业技术学院/河北省高校生物反应器与蛋白类药物应用技术研发中心,河北石家庄 050026;
2.河北中医学院科研中心,河北石家庄 050091; 3.河北师范大学生命科学学院,河北石家庄 050024
Author(s):
Wu Taoet al
关键词:
分子医药农业转基因花生微型人胰岛素载体构建基因表达
Keywords:
-
分类号:
Q786
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
制备和培养含微型人胰岛素基因的转基因花生植株,从而利用转基因花生表达微型人胰岛素。首先按照植物偏爱密码子设计合成了修饰C肽的微型人胰岛素基因(mini insulin,MI),其中胰岛素B链通过丙-丙-赖三肽和A链相连接,在表达载体pBI121上构建了由花椰菜花叶病毒CAMV35S启动子驱动表达微型人胰岛素的重组质粒RIG。质粒RIG经农杆菌介导法转化至花生胚和去胚子叶中,抗生素筛选得到转基因花生苗,之后利用PCR和Western-blot对转基因花生幼叶进行分子生物学鉴定。结果显示,试验优化了农杆菌介导的花生转基因技术,并且得到了转基因花生苗;分子生物学技术鉴定结果显示,微型人胰岛素基因成功转入花生叶片基因组中,且在花生叶片中表达,其中以花生胚为外植体长出的再生苗的阳性检测率为2.27%。目前正在探索微型人胰岛素基因在花生油体中高效表达的方法,为转基因花生规模化生产微型人胰岛素提供理论基础。
Abstract:
-

参考文献/References:

[1]Tucker M E. IDF Atlas:about 415 million adults worldwide have diabetes[R]. International Diabetes Federation,2015.
[2]Melmed S,Polonsky K S,Larsen P R,et al. Williams textbook of endocrinology[M]. Philadelphia:Elsevier Medicine,2007:1371-1435.
[3]Shi Y,Hu F B. The global implications of diabetes and cancer[J]. Lancet,2014,383(9933):1947-1948.
[4]蒋丽华,胡玲. 胰岛素强化治疗对新诊断2型糖尿病患者β细胞功能及病情缓解的影响[J]. 中国全科医学,2010,13(36):4055-4057,4065.
[5]阿丽塔,刘晓婷. 全球抗糖尿病药物研发现状及市场分析[J]. 中国药房,2013,24(29):2689-2691.
[6]Aggarwal S R. Whats fueling the biotech engine—2011 to 2012[J]. Nature Biotechnology,2012,30(12):1191-1197.
[7]姜宁,吕晔,陈执中. 重组人胰岛素类似物的研究应用进展[J]. 食品与药品,2012,14(11):445-447.
[8]冯佑民,张友尚. 重组人胰岛素研究的回顾和展望[J]. 生物工程进展,1996,16(4):26-32.
[9]张冉. 利用油菜油体系统表达重组人胰岛素原的研究[D]. 上海:上海师范大学,2010.
[10]张友尚. 胰岛素生产的回顾与展望[J]. 食品与药品,2008,10(1):1-3.
[11]Thim L,Hansen M T,Norris K,et al. Secretion and processing of insulin precursors in yeast[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,1986,83(18):6766-6770.
[12]Yanagita M,Hoshino H,Nakayama K,et al. Processing of mutated proinsulin with tetrabasic cleavage sites to mature insulin reflects the expression of furin in nonendocrine cell-lines[J]. Endocrinology,1993,133(2):639-644.
[13]Nykiforuk C L,Boothe J G,Murray E W,et al. Transgenic expression and recovery of biologically active recombinant human insulin from Arabidopsis thaliana seeds[J]. Plant Biotechnology Journal,2006,4(1):77-85.
[14]Markley N,Nykiforuk C,Boothe J,et al. Producing proteins using transgenic oilbody-oleosin technology[J]. Biopharm International,2006,19(6):34-47.
[15]Siloto R M,Findlay K,Lopez-Villalobos A,et al. The accumulation of oleosins determines the size of seed oilbodies in Arabidopsis[J]. Plant Cell,2006,18(8):1961-1974.
[16]张昱,张小平,赵凌侠. 利用烟草表达重组人胰岛素原的初步研究[J]. 上海交通大学学报(农业科学版),2010,28(1):14-18,52.
[17]张丹凤,余自青,吴锁伟,等. 植物生物反应器在分子医药农业中的应用[J]. 中国生物工程杂志,2016,36(1):86-94.
[18]曲勍,李校堃,于雅琴. 利用油体表达系统生产外源重组蛋白[J]. 中国生物工程杂志,2007,27(8):111-115.
[19]周曙东,孟桓宽. 中国花生主产区种植面积变化的影响因素[J]. 江苏农业科学,2017,45(13):250-253.
[20]颜丙囤,侯学会,梁守真,等. 花生叶鲜生物量的高光谱估算模型[J]. 江苏农业科学,2017,45(8):59-62.
[21]梁克红,朱大洲,孙君茂,等. 品种与产地因素对花生营养品质的影响[J]. 江苏农业科学,2017,45(17):73-76.
[22]赵会芳,张习金,张永康,等. 索氏抽提法测定花生脂肪含量的方法改进[J]. 江苏农业科学,2017,45(10):154-156,163.
[23]耿丽丽. 转Bt cry8Ea1、cry8Ha1基因花生的研究[D]. 北京:中国农业科学院,2011:54-75.
[24]Zhang Y S,Xu Y G,Li W,et al. Preparation of animal insulin through calcium phosphate gel adsorption[C]// Modern trends in protein and enzyme research. Beijing,1993:241-243.
[25]Chen M H,Huang L F,Li H M,et al. Signal peptide-dependent targeting of a rice alpha-amylase and cargo proteins to plastids and extracellular compartments of plant cells[J]. Plant Physiology,2004,135(3):1367-1377.
[26]蒋滢. 基于大豆种子油体系统表达重组白介素IL-21的研究[D]. 沈阳:沈阳师范大学,2014:32-33.

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备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期:2017-10-17
基金项目:河北省高等学校科学技术研究重点项目(编号:ZD2014087);河北省高等学校科学技术研究重点项目(编号:ZH2012081)。
作者简介:仵陶(1985—),女,河北石家庄人,硕士,助教,主要从事植物生物反应器生产蛋白类药物研究。Tel:(0311)85110352;E-mail:wt12327@126.com。
通信作者:安胜军,博士,教授,主要从事植物生物反应器生产蛋白类药物研究,E-mail:sjsjan@126.com;朱正
更新日期/Last Update: 2019-02-20