|本期目录/Table of Contents|

[1]温书香,安利民,赵协,等.猪伪狂犬病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用[J].江苏农业科学,2019,47(07):50-53.
　Wen Shuxiang,et al.Establishment and application of a real-time fluorescence quatitative PCR method for detection of pseudorabies virus[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2019,47(07):50-53.
点击复制

猪伪狂犬病毒实时荧光定量PCR检测方法
的建立及初步应用(PDF)
分享到：

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第47卷
期数:
2019年第07期
页码:
50-53
栏目:
生物技术
出版日期:
2019-05-10

文章信息/Info

Title:
Establishment and application of a real-time fluorescence quatitative PCR method for detection of pseudorabies virus
作者:
温书香;  安利民;  赵协;  张军;  潘燕燕;  葛位西
河南省漯河市动物疫病预防控制中心，河南漯河 462300
Author(s):
Wen Shuxiang; et al
关键词:
猪伪狂犬病毒; 荧光定量PCR技术; 灵敏度; 标准曲线
Keywords:
-
分类号:
S858.285.3
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
为建立一种快速、特异、鉴别诊断猪伪狂犬病毒野毒感染与疫苗免疫株，参考GenBank上公布的猪伪狂犬病毒gE基因序列设计了1对引物，以猪伪狂犬病毒核酸作为模板，PCR方法将扩增得到的核酸序列克隆到PEGM-18T载体上，将克隆载体转化到DH5α感受态细胞中，测序鉴定阳性重组质粒作为标准品建立猪伪狂犬病毒荧光定量PCR检测方法。结果表明，本研究所建立的猪伪狂犬病毒荧光定量PCR方法检测灵敏度可达10拷贝，与蓝耳病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒不发生交叉反应，具有良好的特异性和可重复性。此外，对33份疑似猪伪狂犬病料也作了检测，结果表明，2份病料均为阳性。本研究建立的猪伪狂犬病毒实时荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好、不发生交叉反应等优点，可用于日常猪伪狂犬病毒野毒感染与疫苗免疫株的鉴别诊断。
Abstract:
-

参考文献/References:

［1］Liu H，Li X T，Hu B，et al. Outbreak of severe pseudorabies virus infection in pig-offal-fed farmed mink in Liaoning Province，China［J］. Archives of Virology，2017，162(3)：863-866.
［2］Wu C Y，Wu C W，Liao C M，et al. Enhancing expression of the pseudorabies virus glycoprotein E in yeast and its application in an indirect sandwich ELISA［J］. Journal of Applied Microbiology，2017，123(3)：594-601.
［3］华利忠，刘剑锋，冯志新，等. 猪伪狂犬病病毒新流行变异毒株的研究进展［Ｊ］. 江苏农业学报，２０１７，３３(２)：４７６-４８０.
［4］龚双燕，李小璟，李幽幽，等. 猪传染性胃肠炎病毒SYBRGreenⅡ荧光定量PCR检测方法的建立及在初乳检测上的应用［J］. 江苏农业学报，2017，33(5)：1076-1081.
［5］Kong X D，Li L，Sun L，et al. Rapid diagnosis of aneuploidy using segmental duplication quantitative fluorescent PCR［J］. PLoS One，2014，9(3)：e88932.
［6］Fei B Y，Lv H X，Zheng W H. Fluorescent quantitative PCR of Mycobacterium tuberculosis for differentiating intestinal tuberculosis from Crohns disease［J］. Brazilian Journal of Medical and Biological Research，2014，47(2)：166-170.
［7］Leifer I，Blome S，Beer M，et al. Development of a highly sensitive real-time RT-PCR protocol for the detection of classical swine fever virus Independent of the 5′ untranslated region［J］. Journal of Virological Methods，2011，171(1)：314-317.

相似文献/References:

[1]杨加琼.免疫程序对猪伪狂犬病毒抗体效价的影响[J].江苏农业科学,2014,42(10):209.
　Yang Jiaqiong.Effect of immune programme on porcine pseudorabies virus antibody titer[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(07):209.
[2]郭广富,曹军平,朱爱萍,等.猪伪狂犬病病毒泰州株的分离鉴定[J].江苏农业科学,2015,43(03):200.
　Guo Guangfu,et al.Isolation and identification of pig pseudorabies virus Taizhou strain[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2015,43(07):200.
[3]王先坤,谭磊,徐凯文,等.猪伪狂犬病毒HN-LD株分离鉴定及部分毒力基因遗传进化分析[J].江苏农业科学,2022,50(10):171.
　Wang Xiankun,et al.Isolation and identification of pseudorabies virus HN-LD strain and genetic analysis of partial virulence genes[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2022,50(07):171.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2017-11-22
基金项目：2015年河南省漯河市青年拔尖人才支持计划。
作者简介：温书香(1988—)，女，河南商丘人，硕士，初级兽医师，主要从事猪伪狂犬病研究。E-mail：1327372534@qq.com。
通信作者：赵协，硕士，中级兽医师，主要从事猪伪狂犬病研究。E-mail：wiwj6969@126.com。
更新日期/Last Update: 2019-04-05