«上一篇/Previous Article|本期目录/Table of Contents|下一篇/Next Article»

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第47卷

期数:

2019年第09期

页码:

214-218

栏目:

畜牧兽医与水产蚕桑

出版日期:

2019-05-27

文章信息/Info

Title:

Induced expression and product purification of recombinant porcine interferon alpha

作者:

沈继朵¹;  王聪¹;  张莉¹;  栗俞程²; 3

1.河南中医药大学药学院，河南郑州 450046； 2.河南中医药大学科研实验中心，河南郑州 450046；
3.河南省仲景方药现代研究重点实验室，河南郑州 450046

Author(s):

Shen Jiduo; et al

关键词:

猪α干扰素; 工程菌; 诱导表达; 包涵体; 纯化

Keywords:

-

分类号:

S188

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

为获得大量猪α干扰素的重组蛋白，研究了其发酵条件，并对目的蛋白进行分离纯化。考察了不同IPTG诱导浓度(0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.5 mmol/L)、不同诱导温度(17、27、32、37 ℃)、不同诱导时间(0、2、3、4、5、6、7、8 h)对目的蛋白表达的影响；同时对包涵体进行提取、溶解变性进行研究，最后采用Ni柱亲和层析纯化目的蛋白。采用SDS-PAGE电泳及Image Pro Plus 6.0软件分析电泳结果，结果显示，IPTG诱导浓度为 1.0 mmol/L、诱导温度为27 ℃、诱导时间为6 h时，目的蛋白表达量最多；超声波破碎细菌的最优时长循环为10 s/10 s；8 mol/L尿素溶解包涵体过夜可得到大量可溶性目的蛋白含量，Ni柱亲和层析后可去除大量杂蛋白，获得较纯的目的蛋白。可见本试验通过优化重组猪α干扰素诱导表达条件及纯化方法，获得了高表达、高纯度的重组猪α干扰素蛋白，为今后研究其生物活性奠定了初步基础。

Abstract:

-

参考文献/References:

［1］刘树成. 干扰素的分类与合理应用［J］. 北方药学，2016，13(11)：152-153.
［2］尹训强，张冰，郑洁. 猪重组干扰素α治疗哺乳仔猪腹泻的临床试验报告［J］. 今日养猪业，2018(6)：80-81.
［3］王荣谈，郭佳宏，彭丽英，等. 重组猪γ-干扰素的表达与纯化［J］. 上海农业学报，2014，30(2)：10-14.
［4］付加雷，宋长征，张更林. 重组干扰素-tau在大肠杆菌中的高效表达［J］. 食品与药品，2006，8(11)：35-38.
［5］钟颖，牛婷，代洪波，等. 重组猪干扰素α 6在毕赤酵母中表达及其活性研究［J］. 湖北畜牧兽医，2018，39(8)：5-7.
［6］王海春，贾红，袁维峰，等. 悬浮培养Sf21细胞高效表达牛γ-干扰素及其特性鉴定［J］. 中国畜牧兽医，2012，39(11)：1-6.
［7］吴三桥，赵冠杰，万健，等. 抗菌肽SMAP-29在大肠杆菌中表达条件的优化及纯化研究［J］. 江苏农业科学，2018，46(9)：44-47.
［8］杨欣，曾献武，严君喜，等. 重组人干扰素α2b包涵体纯化方法的研究［J］. 中国生化药物杂志，2001，22(6)：295-297.
［9］邵菁，于瑞嵩，董世娟，等. 重组猪α干扰素的亲和层析［J］. 上海农业学报，2007，23(4)：31-33.

相似文献/References:

[1]赵丽红,陈威,高艳娇,等.基因组重排技术在微生物育种中的应用研究进展[J].江苏农业科学,2018,46(18):1.
　Zhao Lihong,et al.Application and research progress of genome shuffling in microorganism breeding[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2018,46(09):1.

备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2019-01-03
基金项目：河南中医药大学科研苗圃工程项目(编号：MP2017-12)。
作者简介：沈继朵(1983—)，女，江苏宿迁人，硕士，实验师，主要从事生化与分子生物学教学与研究工作。E-mail：lycdd1219@163.com。
通信作者：栗俞程，博士，副教授，从事天然活性化合物药理机制研究。E-mail：liyucheng@hactcm.edu.cn。

常用功能

更新日期/Last Update: 2019-05-05