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[1]刘玲,陈祥平,范小敏,等.桑树SSR-PCR反应体系的优化[J].江苏农业科学,2019,47(14):45-49,58.
　Liu Ling,et al.Optimization of SSR-PCR reaction system for mulberry[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2019,47(14):45-49,58.
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桑树SSR-PCR反应体系的优化(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第47卷
期数:
2019年第14期
页码:
45-49,58
栏目:
生物技术
出版日期:
2019-08-10

文章信息/Info

Title:
Optimization of SSR-PCR reaction system for mulberry
作者:
刘玲1;  陈祥平1;  范小敏1;  傅晓2;  柯皓天2;  吕银2
1.四川省丝绸科学研究院，四川成都 610031； 2.四川省丝绸工程技术研究中心，四川成都 610031
Author(s):
Liu Ling; et al
关键词:
桑树; 正交试验设计; 单因素试验; SSR-PCR反应体系优化
Keywords:
-
分类号:
S888.2
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
为了建立经济稳定的桑树简单重复序列(SSR)-PCR反应体系，为SSR分子标记在桑树研究中更广泛地应用提供试验基础，采用L16(45)正交试验设计和单因素试验，对桑树SSR-PCR反应体系中的模板DNA浓度、引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度和rTaq酶用量5个因素的4个水平进行优化分析，并比较这5个因素的不同浓度对扩增效果的影响。结果表明，各因素水平变化对反应体系的影响大小依次为Mg2+、dNTPs>引物>模板DNA>rTaq酶。研究最终确立了最佳反应体系，即在10 μL反应体系中，含有1.5 μL 10~20 ng/μL DNA模板、0.4 μL 25 mmol/L Mg2+、0.5 μL 2 mmol/L dNTPs、各0.15 μL 20 μmol/L正反向引物、0.1 μL 5 U/μL rTaq酶和1 μL 10×loading buffer。通过稳定性检测，表明该体系能够用于桑树的SSR分析。
Abstract:
-

参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2018-04-28
基金项目：四川省科技计划(编号：2017JY0277)；四川省科技创新产业链项目(编号：2016NZ0004)。
作者简介：刘玲(1989—)，女，山西大同人，硕士，助理工程师，主要从事桑树的分子标记工作。E-mail：liuling1022@yeah.net。
更新日期/Last Update: 2019-07-20