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[1]徐悦,周明旭,朱纯,等.产低毒性脂多糖大肠杆菌J5基因重组株的构建[J].江苏农业科学,2020,48(17):54-58.
 Xu Yue,et al.Construction of gene recombinant strain of Escherichia coli strain J5 producing low-toxic lipopolysaccharides[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2020,48(17):54-58.
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产低毒性脂多糖大肠杆菌J5基因重组株的构建(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第48卷
期数:
2020年第17期
页码:
54-58
栏目:
生物技术
出版日期:
2020-09-05

文章信息/Info

Title:
Construction of gene recombinant strain of Escherichia coli strain J5 producing low-toxic lipopolysaccharides
作者:
徐悦1 周明旭1 朱纯12 尹文竹1 马芳1 鲍熹1 张金秋1 卢宇12345
1.江苏省农业科学院动物免疫工程研究所/江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京 210014;
2.南京农业大学动物医学院,江苏南京 210095; 3.江苏省食品质量安全重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地,江苏南京 210014;
4.江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州 225009; 5.江苏大学药学院,江苏镇江 212013
Author(s):
Xu Yueet al
关键词:
大肠杆菌MPLARed同源重组佐剂疫苗细菌脂多糖
Keywords:
-
分类号:
S182
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
细菌脂多糖(LPS)对宿主细胞具有一定的毒性,但经修饰后的单磷酸类脂A(MPLA)却是一种无毒性的高效免疫佐剂。选择天然O抗原不完全的大肠杆菌J5疫苗株为出发菌株,利用λ-Red同源重组技术导入外源弗朗西斯菌(Francisella novicida)lpxE基因,缺失大肠杆菌lpxM基因。结果显示,J5ΔlacI::lpxEΔlpxM基因重组株的LPS鲎试剂活性较DH5α和J5原菌显著降低;对4周龄的ICR小鼠腹腔注射LPS提取物,重组菌和PBS组的小鼠体征及肝脏切片均正常。同时,腹腔注射大肠杆菌J5和DH5α的小鼠被毛凌乱、精神抑郁、肝脏细胞肿大,发生炎性浸润,有明显的毒性反应。以上结果说明,J5重组菌的LPS已经区别于原菌,是低毒性的MPLA产物。上述重组株的成功构建,能为生产廉价的兽用MPLA免疫佐剂奠定工作基础。
Abstract:
-

参考文献/References:

[1]Wang X Y,Quinn P J. Endotoxins:structure,function and recognition[M]. Berlin:Springer,2010.
[2]Gregg K A,Harberts E,Gardner F M,et al. Rationally designed TLR4 ligands for vaccine adjuvant discovery[J]. Mbio,2017,8(3):e00417-e00492.
[3]Schülke S,Flaczyk A,Vogel L,et al. MPLA shows attenuated pro-inflammatory properties and diminished capacity to activate mast cells in comparison with LPS[J]. Allergy,2015,70(10):1259-1268.
[4]Tomita G M,Todhunter D A,Hogan J S,et al. Immunization of dairy cows with an Escherichia coli J5 lipopolysaccharide vaccine[J]. Journal of Dairy Science,1995,78(10):2178-2185.
[5]Abdulaziz T A. Elsukhon S N. Chickens hyperimmunized with Escherichia coli J5 strain are protected against experimental challenge with Escherichia coli O78 serotype[J]. Veterinary Research Communications,1998,22(1):7.
[6]Aslam M,Whitemore H L,Kakoma I. Effect of E.coli J5 vaccine and intramammary challenge with live Escherichia coli in lactating dairy goats[J]. Small Ruminant Research,1995,17(3):275-281.
[7]王刚. E.coli J5菌苗对兔实验性感染巴氏杆菌的保护作用[J]. 预防兽医学进展,2000(3):48-49.
[8]李颜颜. 弗朗西斯菌类脂A的结构多样性及其分子机制研究[D]. 无锡:江南大学,2012.
[9]李颜颜,史锋,李烨,等. 细菌类脂A结构与功能研究进展[J]. 微生物学报,2008,48(6):844-849.
[10]Horton R M,Cai Z L,Ho S N,et al. Gene splicing by overlap extension:tailor-made genes using the polymerase chain reaction,BioTechniques,1990,8(5):528-535.
[11]郭志燕. FimA介导F18ab+大肠杆菌病原性的研究[D]. 扬州:扬州大学,2014.
[12]胡会杰,周明旭. 猪源产肠毒素大肠杆菌eltA、flhD、fimA、faeG基因启动子的预测,克隆和鉴定[J]. 中国兽医学报,2015,35(10):1640-1645.
[13]Buelow P. The ONPG test in diagnostic bacteriology. Comparison of the ONPG test and the conventional lactose-fermentation test[J]. Acta Pathologica et Microbiologica Scandinavica,1964,60(3):387-402.
[14]Li Y,Powell D A,Shaffer S A,et al. LPS remodeling is an evolved survival strategy for bacteria[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences,2012,109(22):8716-8721.
[15]朱丽华,熊御云,夏琳,等. 积雪草酸预处理对脓毒症小鼠急性肾损伤的影响及机制[J]. 山东医药,2017,57(30):10-13.
[16]Kanistanon D,Hajjar A M,Pelletier M R,et al. A francisella mutant in lipid a carbohydrate modification elicits protective immunity[J]. PLoS Pathogens,2008,4(2):e24.
[17]冯将,王玉坤,魏玉好,等. 猪源大肠杆菌脂多糖的提取、纯化及活性分析[J]. 中国畜牧兽医,2017,44(3):912-919.

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[10]王东升,张世栋,李宏胜,等.大肠杆菌感染对猪血液生化指标的影响[J].江苏农业科学,2014,42(04):172.
 Wang Dongsheng,et al.Effect of Escherichia coli infection on blood biochemical indices of pigs[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(17):172.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期:2019-09-17
基金项目:江苏省农业科学院基本科研业务专项[编号:ZX(19)7006]。
作者简介:徐悦(1986—),女,江苏南京人,硕士,助理研究员,主要从事细菌佐剂与疫苗研究,E-mail:xellos05@163.com;共同第一作者:周明旭(1987—),男,江苏南京人,博士,助理研究员,主要从事牛源细菌病及其相关疫苗研究,E-mail:zhoumingxu@outlook.com。
通信作者:卢宇,研究员,主要从事疫苗制剂工艺研究。E-mail:
更新日期/Last Update: 2020-09-05