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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第47卷

期数:

2019年第14期

页码:

62-65

栏目:

生物技术

出版日期:

2019-08-10

文章信息/Info

Title:

Cloning，protein prokaryotic expression and antibody preparation of ORF72 gene in cyprinid herpesvirus

作者:

李双¹;  向涛¹;  周海峰¹;  吴霆¹; 2;  顾伟¹;  王文¹;  孟庆国¹

1.南京师范大学生命科学学院/江苏省水生甲壳动物病害重点实验室，江苏南京 210023；
2.江苏省宝应县水生动物疫病预防控制中心，江苏宝应 225800

Author(s):

Li Shuang; et al

关键词:

异育银鲫; 鲤疱疹病毒Ⅱ型; ORF72; 多克隆抗体; Western Blotting

Keywords:

-

分类号:

S941.41

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

异育银鲫作为我国重要的淡水经济鱼类，其鳃出血病为主要病害，并造成重大经济损失，该病病原为鲤疱疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus Ⅱ，CyHV-2)。目前，研究主要在该病的检测和病理方面，对于免疫学检测方面研究较少。本研究根据CyHV-2 ORF72基因序列设计了1对特异性引物，利用患病异育银鲫肾脏DNA作为模板，通过PCR扩增得到CyHV-2 ORF72基因全长，该基因序列全长为1 113 bp，可编码370个氨基酸的蛋白。该基因与pET-28a表达载体连接构建重组原核表达载体pET-ORF72转入大肠杆菌中，经IPTG诱导表达得到了分子量约为45 ku的重组蛋白，与预测的蛋白大小基本一致。将纯化的重组蛋白皮下多点注射免疫新西兰大耳兔制备了ORF72的多克隆抗体，经Western Blotting检测抗体能与病毒粗提液有良好反应，特异性较好，本结果可为下一步建立疫苗和免疫检测方法奠定基础。

Abstract:

-

参考文献/References:

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相似文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2018-04-03
基金项目：渔业重大技术集成与示范推广项目(编号：D2015-13-5)。
作者简介：李双(1990—)，女，山东惠民人，硕士，研究方向为异育银鲫鳃出血病的预防和控制。E-mail：jsws19661314@163.com。
通信作者：孟庆国，博士，副教授，硕士生导师，主要从事水生动物病害和免疫学研究。E-mail：mlzzcld@aliyun.com。

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更新日期/Last Update: 2019-07-20