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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第52卷

期数:

2024年第21期

页码:

204-208

栏目:

畜牧兽医与水产蚕桑

出版日期:

2024-11-05

文章信息/Info

Title:

Preparation and identification of monoclonal antibodies against goose astrovirus Cap protein

作者:

代格¹; 2; 章丽娇²; 黄欣梅²; 3; 杨靖²; 刘青涛²; 3; 韩凯凯²; 3; 刘宇卓²; 李银²; 薛峰¹; 赵冬敏²; 3

1.南京农业大学动物医学院，江苏南京 210095； 2.江苏省农业科学院兽医研究所，江苏南京 210014； 3.江苏大学生命科学学院，江苏镇江 212013

Author(s):

Dai Ge; et al

关键词:

鹅星状病毒; Cap蛋白; 原核表达; 单克隆抗体

Keywords:

-

分类号:

S852.65⁺7

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

制备抗新型鹅星状病毒Cap蛋白的单克隆抗体，为建立基于病毒Cap蛋白的快速诊断方法奠定基础。构建pET-32a-ORF2重组质粒，转化BL21、IPTG诱导，原核表达出新型鹅星状病毒Cap蛋白，并对其分别进行SDS-PAGE和Western Blot鉴定。结果表明，重组蛋白主要以包涵体的形式表达且具有一定的免疫学活性。以原核表达的Cap蛋白为免疫原，免疫6~8周龄BALB/c雌性小鼠，对免疫后血清效价为阳性的小鼠取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合。做间接ELISA筛选出阳性克隆，并以有限稀释法连续进行3次亚克隆，成功筛选出1株分泌抗新型鹅星状病毒Cap蛋白抗体的杂交瘤细胞株，命名为1D7，采用腹水法大量制备单克隆抗体，效价可达1 ∶64 000。鉴定出1D7的亚型为IgM。1D7分别与重组Cap蛋白和接种新型鹅星状病毒的LMH细胞进行Western Blot分析，发现该单抗既能识别重组Cap蛋白又能与新型鹅星状病毒发生特异性反应。

Abstract:

-

参考文献/References:

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相似文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2023-04-22
基金项目：江苏省农业科技自主创新资金［编号：CX(23)3077］；横向课题“雏鹅痛风病因确定和防控方法初探”。
作者简介：代格(1997年—)，女，河南信阳人，硕士研究生，主要从事禽类重大疫病的诊断与防控。E-mail：daigedg123@163.com。
通信作者：赵冬敏，博士，研究员，研究方向为禽类重大疫病的诊断与防控，E-mail：zhaodongmin126@126.com；薛峰，博士，教授，研究方向为人兽共患病防制新技术及其病原学基础，E-mail：xuefeng@njau.edu.cn。

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更新日期/Last Update: 2024-11-05