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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第42卷

期数:

2014年09期

页码:

45-47

栏目:

生物技术

出版日期:

2014-09-25

文章信息/Info

Title:

Optimization of transformation conditions of tobacco by agrobacterium-mediated vacuum infiltration method

作者:

李晓君;  王绍梅;  谢艳兰;  和敏

临沧师范高等专科学校农学系，云南临沧 677000

Author(s):

Li Xiaojun; et al

关键词:

植物瞬时表达系统; 渗透法; 转化; 农杆菌渗透注射; 烟草; 绿色荧光蛋白(GFP)

Keywords:

-

分类号:

S572.01

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

植物瞬时表达系统常用于研究基因表达产物的亚细胞定位和蛋白间的互作，将GFP-GUS融合蛋白植物表达载体导入农杆菌EHA105，获得工程菌，制备不同浓度的农杆菌浸染液，用注射法对烟草叶片进行转化，荧光显微镜检测烟草叶片原生质体和下表皮中GFP的表达情况。结果表明，浸染注射液的D_{600 nm} 在0.3~0.7之间均具有较高的转化效率，注射后第4天至第6天为较佳观察时间。

Abstract:

-

参考文献/References:

［1］吴玉，杨迎伍，邓伟，等. 番茄EBF2基因的克隆、亚细胞定位与遗传转化［J］. 核农学报，2010，24(3)：490-494.
［2］赵文婷，魏建和，刘晓东，等. 植物瞬时表达技术的主要方法与应用进展［J］. 生物技术通讯，2013，2(2)：294-300.
［3］王华忠，陈雅平，陈佩度. 植物瞬间表达系统与功能基因组学研究［J］. 生物工程学报，2007，23(3)：367-374.
［4］McLntosh K B，Hμlm J L，Young L W，et al. A rapid Agrobacterium-mediated Arabidopsis thaliana transient assay system［J］. Plant Molecular Biology Reporter，2004，22(1)：53-61.
［5］Sparkes I A，Runions J，Kearns A，et al. Rapid，transient expression of fluorescent fusion proteins in tobacco plants and generation of stably transformed plants［J］. Nature Protocols，2006，1(4)：2019-2025.
［6］周雪莉，王园，刘菊华，等. 香蕉MuMADS1基因表达产物的亚细胞定位［J］. 生命科学研究，2009，13(5)：418-421.
［7］Rao K S，Prakash A H. A simple method for the isolation of plant protoplasts［J］. Journal of Biosciences，1995，20(5)：645-655.
［8］吴英杰，姜波，张岩，等. 农杆菌介导的烟草瞬时表达试验条件优化［J］. 东北林业大学学报，2010，38(9)：110-112.
［9］黎茵，张以顺. 农杆菌注射渗透法转化烟草实验研究［J］. 实验技术与管理，2010，27(11)：50-52.
［10］Poon I K，Jans D A. Regulation of nuclear transport：central role in development and transformation？［J］. Traffic，2005，6(3)：173-186.

相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2013-11-25
基金项目：临沧师范高等专科学校高层次人才引进科研启动项目(编号：LXJ2012)；临沧师范高等专科学校校级课题（编号：LCSZL2013001 ）。
作者简介：李晓君(1985—)，女，云南临沧人，博士，讲师，主要从事植物生物技术与种质创新研究。E-mail：lxj-148@163.com。

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更新日期/Last Update: 2014-09-25