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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第44卷

期数:

2016年05期

页码:

47-50

栏目:

生物技术

出版日期:

2016-05-25

文章信息/Info

Title:

Molecular cloning，expression and characterization of a novel PlclpP gene encoding ATP-dependent ClpP protease of Paenibacillus lautus CHN26

作者:

龚丽;  李云霞

上海海洋大学食品科学与技术学院/农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估重点实验室，上海 201306

Author(s):

Gong Li; et al

关键词:

ClpP家族蛋白水解酶; 类芽孢杆菌; 基因; 克隆; 表达; 酶学特性

Keywords:

-

分类号:

Q789

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

运用基因克隆技术，以分离鉴定获得的蛋白水解酶高活性类芽孢杆菌(Paenibacillus lautus)CHN26菌株的基因组DNA为模板，经克隆鉴定该菌株是一种新型ATP-依赖型ClpP家族蛋白水解酶PlclpP基因，全长585 bp，编码194个氨基酸，分子量约为21 ku。采用大肠杆菌(Eschericia coli)pET表达系统构建PlclpP基因表达质粒pET-28-PlclpP，并在大肠杆菌BL21中实现了重组PlClpP蛋白的表达。利用组氨酸标签(His-tag)亲和纯化法获得 PlClpP 纯化蛋白，发现PlClpP可能与宿主菌未知伴侣分子形成蛋白复合物。PlClpP复合物具有ATP-依赖型酪蛋白水解酶活性，最适反应温度为40 ℃、pH值7.0。表面活性剂强烈抑制PlClpP复合物的酶活性，而常规丝氨酸蛋白酶抑制剂对其活性没有抑制作用。本研究结果为蛋白酶新基因资源的开发、ClpP家族蛋白酶的基础理论和应用研究奠定了基础。

Abstract:

-

参考文献/References:

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相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2015-04-07
基金项目：上海市科学技术委员会项目(编号：09320503600)。
作者简介：龚丽(1989—)，女，上海人，硕士研究生，主要从事食品质量与安全研究。E-mail：emo_jun@163.com。

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更新日期/Last Update: 2016-05-25