[1]崔泽旭,金前跃,郭振华,等.猪伪狂犬病病毒US9蛋白多克隆抗体制备及其应用[J].江苏农业科学,2026,54(13):193-198.
　Cui Zexu,et al.Preparation and application of polyclonal antibody against pseudorabies virus US9 protein[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2026,54(13):193-198.
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猪伪狂犬病病毒US9蛋白多克隆抗体制备及其应用()

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第54卷
期数:
2026年第13期
页码:
193-198
栏目:
动物科学与动物医学
出版日期:
2026-07-05

文章信息/Info

Title:
Preparation and application of polyclonal antibody against pseudorabies virus US9 protein
作者:
崔泽旭1; 2; 3; 金前跃2; 郭振华2; 柴永笑2; 邢广旭2; 王磊3; 卢清侠1; 2
1.河南省农业科学院畜牧研究所，河南郑州 450002； 2.河南省农业科学院动物疫病防控研究所(动物免疫学重点实验室)，河南郑州 450002； 3.河南科技学院动物科技学院，河南新乡 453003
Author(s):
Cui Zexu; et al
关键词:
猪伪狂犬病病毒; US9基因; 原核表达; 多克隆抗体
Keywords:
-
分类号:
S852.65+1
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
为获得猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus，PRV)US9重组蛋白，并制备能够识别US9蛋白的特异性多克隆抗体，根据PRV HeNLH/2017株US9基因序列设计引物，扩增US9基因并克隆至原核表达载体pET-30a(+)。将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)，在不同温度下进行诱导表达。随后利用Ni-NTA亲和层析纯化重组US9蛋白，以此为免疫原免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体，并通过SDS-PAGE、Western blot和间接ELISA分析重组蛋白表达效果及抗体特性。结果表明，构建了pET-30a-US9重组质粒，并确定了其最佳诱导表达条件为1 mmol/L IPTG、37 ℃诱导4 h。重组表达的US9蛋白分子量约为20 ku，且能被His标签抗体特异性识别。随后，利用纯化的US9重组蛋白作为免疫原成功制备了效价高达1 ∶[KG-*3]64 000~1 ∶[KG-*3]128 000的多克隆抗体，且该抗体能够与重组US9蛋白、293T细胞中过表达的US9蛋白以及PRV感染细胞中的US9蛋白发生特异性反应。综上，成功获得了高纯度PRV US9重组蛋白，并制备了具有高效价和良好特异性的多克隆抗体，可作为US9蛋白功能研究的重要检测工具。
Abstract:
-

参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2026-04-12
基金项目：中原科技创新领军人才(编号：254200510007)。
作者简介：崔泽旭(2000—)，男，河南许昌人，硕士研究生，主要从事动物病毒学研究。E-mail：3429538415@qq.com。
通信作者：卢清侠，博士，研究员，主要从事动物病毒学与免疫学研究，E-mail：luqingxia82@163.com；王磊，博士，教授，主要从事动物病原和新兽药研究，E-mail：wlei_007@163.com。
更新日期/Last Update: 2026-07-05