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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第50卷

期数:

2022年第22期

页码:

159-165

栏目:

畜牧兽医与水产蚕桑

出版日期:

2022-11-20

文章信息/Info

Title:

Preparation and identification of monoclonal antibodies against spike protein of goose astrovirus

作者:

卢清侠¹; 李伟²; 金前跃¹; 郭振华¹; 冯丽丽³; 邢云瑞¹; 柴书军¹; 邢广旭¹; 张改平¹

1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室，河南郑州 450002； 2.河南农业大学生命科学学院，河南郑州 4500023；3.河南省农业科学院农业经济与信息研究所，河南郑州 450002

Author(s):

Lu Qingxia; et al

关键词:

鹅星状病毒; 刺突蛋白; 单克隆抗体; 抗原表位

Keywords:

-

分类号:

S852.65

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

为了制备鹅星状病毒(goose astrovirus，GAstV)刺突(Spike)蛋白的单克隆抗体，并对获得的单克隆抗体的生物学特性进行鉴定，将大肠杆菌表达的截短Spike蛋白免疫BALB/c小鼠，经细胞融合和单克隆抗体的筛选来获得阳性杂交瘤细胞，并进一步利用免疫印迹和间接免疫荧光技术进行单抗的鉴定；采用ELISA技术进行单克隆抗体亚型、抗体效价的测定；同时根据GAstV XX株 Spike蛋白序列合成重叠的多肽库进行单抗识别的抗原表位鉴定。共获得3株阳性杂交瘤细胞，分别命名为1A5、2B4、12E6；免疫印迹和间接免疫荧光实验显示3株单克隆抗体均与Spike蛋白具有良好的免疫反应，其中2B4、12E6可与GAstV发生反应；亚型鉴定结果显示单抗12E6、2B4为IgG2b亚类，单抗1A5为 IgG2a亚类；轻链均为κ链；敏感性结果显示，抗体效价都在1 ∶[KG-*3]51 200以上；抗原表位的鉴定结果表明单抗1A5识别的抗原表位为(EP16)ELRNRLNIADGDYVI，单抗2B4识别的抗原表位为(EP21)AGDSNPGETFQNFKM。本研究成功制备了针对GAstV Spike蛋白的单克隆抗体，并鉴定出2个新的抗原表位，为建立快速、简便的GAstV检测方法奠定了基础。

Abstract:

-

参考文献/References:

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相似文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2022-07-05
基金项目：中原英才计划(育才系列)-中原青年拔尖人才(编号：ZYYCYU202012148)；河南省自然科学基金优秀青年科学基金(编号：222300420051)；河南省农业科学院自主创新项目(编号：2022ZC67)。
作者简介：卢清侠(1982—)，女，山西侯马人，博士，副研究员，研究方向为动物病毒与免疫学。E-mail：luqingxia82@163.com。
通信作者：张改平，博士，研究员，中国工程院院士，主要研究方向为动物免疫学。E-mail：zhanggaip@126.com。

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更新日期/Last Update: 2022-11-20