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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第45卷

期数:

2017年14期

页码:

12-16

栏目:

生物技术

出版日期:

2017-07-20

文章信息/Info

Title:

Assembly of histone octamer and detection of nucleosome assembly efficiency in vitro by fluorescence labeling

作者:

刘媛;  张凤慧;  赵宏宇;  蔡禄

内蒙古科技大学生命科学与技术学院，内蒙古包头 014010

Author(s):

Liu Yuan; et al

关键词:

核小体; 组蛋白; 荧光标记; 序列模体; 体外组装; 定位

Keywords:

-

分类号:

Q71

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

基于影响核小体定位的DNA序列TA 10-bp周期性和R5Y5序列模体，设计6条对组蛋白亲和性不同的DNA序列，将其克隆到重组质粒中，分别命名为CS1~CS6。通过PCR扩增的方法，在引物上标记Cy3荧光信号分子，获得大量标有Cy3的目的序列；同时，从大肠杆菌中表达纯化了H₂A、H₂B、H₃、H₄共4种组蛋白，经复性装配成组蛋白八聚体，利用盐透析法将目的DNA序列与组蛋白八聚体组装成核小体结构；经荧光信号检测，分析6条目的序列形成核小体的能力。结果发现，CS2、CS3形成核小体的能力较强，该结果与Trifonov EN提出的核小体在该模体上的精确定位基本吻合，该试验方法的建立对核小体结构及相关表观遗传学领域的研究具有一定的意义。

Abstract:

-

参考文献/References:

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［3］王成爱，赵宏宇，邢永强，等. 酿酒酵母核小体定位理论模型的体外实验验证［J］. 生命科学研究，2014，18(1)：21-27.
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［12］蔡禄，赵秀娟，刘国庆，等. 表观遗传学前沿［M］. 北京：清华大学出版社，2012：191-192.

相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2016-03-18
基金项目：国家自然科学基金(编号：61072129、11547150)；内蒙古自然科学基金(编号：2013MS0514)。
作者简介：刘媛(1988—)，女，内蒙古包头人，硕士，主要从事表观遗传学研究。E-mail：736745380@qq.com。
通信作者：蔡禄，博士，教授，主要从事分子生物学和生物信息学研究。E-mail：nmcailu@163.com。

常用功能

更新日期/Last Update: 2017-07-20