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[1]赵烨清,石莉,欧阳臻,等.化学-渗透压法温和破碎处理下大肠杆菌细胞胞内蛋白质的释放率[J].江苏农业科学,2017,45(19):146-149.
　Zhao Yeqing,et al.Release rate of intracellular protein in Escherichia coli cells under chemical-osmotic pressure treatment[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2017,45(19):146-149.
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化学-渗透压法温和破碎处理下大肠杆菌细胞
胞内蛋白质的释放率(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第45卷
期数:
2017年19期
页码:
146-149
栏目:
生物技术
出版日期:
2017-10-05

文章信息/Info

Title:
Release rate of intracellular protein in Escherichia coli cells under chemical-osmotic pressure treatment
作者:
赵烨清;  石莉;  欧阳臻;  闻崇炜
江苏大学药学院，江苏镇江 212013
Author(s):
Zhao Yeqing; et al
关键词:
化学-渗透压法; 细胞破碎; 温和高效; 胞内蛋白质; 可溶性
Keywords:
-
分类号:
Q939.97
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
恰当的细胞破碎工艺是获取胞内蛋白质的必需环节，然而现有细胞破碎技术仍有较多不足。为了研究合适的细胞破碎方法，拟通过化学法与渗透压法的联用，建立化学-渗透压法温和高效破碎大肠杆菌细胞的新工艺。结果表明：(1)单用化学法处理大肠杆菌细胞，最高仅能释放37.3%的胞内蛋白质，而化学-渗透压法最高可以释放842%的胞内蛋白质；对渗透压处理环节进行优化后，胞内蛋白质释放率提高至93.1%及以上；(2)以优化的化学-渗透压法释放重组原动蛋白2β(PK2β)工程菌细胞的胞内蛋白质，其中70.5%~80.2%重组PK2β呈可溶性，而超声法处理的样品中不含有可溶性重组PK2β，表明化学-渗透压法不仅简便高效、成本低廉，而且有利于保留可溶性重组蛋白质，而超声破碎法会导致可溶性蛋白发生变性沉淀而增加蛋白质分离的难度。综合分析可知，化学-渗透压法在基因工程及生物工程中具有良好的应用前景。
Abstract:
-

参考文献/References:

［1］Peternel S. Bacterial cell disruption：a crucial step in protein production［J］. New Biotechnology，2013，30(2)：250-254.
［2］吴蕾，洪建辉，甘一如，等. 高压匀浆破碎释放重组大肠杆菌提取包含体过程的研究［J］. 高校化学工程学报，2001，15(2)：191-194.
［3］Feliu J X，Cubarsi R，Villaverde A. Optimized release of recombinant proteins by ultrasonication of E. coli cells［J］. Biotechnology and Bioengineering，1998，58(5)：536-540.
［4］刘建荣，王慧，赵晓瑜，等. 化学渗透法破碎基因重组E.coli提取重组人SOD包含体和复性［J］. 高校化学工程学报，2011，25(1)：96-102.
［5］沈徐凯，周斌，王云艳，等. 丙酮破碎法提取重组大肠杆菌表达的转谷氨酰胺酶酶原［J］. 生物技术通报，2011(5)：223-226.
［6］刘冬，吴亚丽，张丽君，等. 重组降血压肽基因工程菌破碎方法研究［J］. 河南工业大学学报(自然科学版)，2006，27(3)：53-56.
［7］郭芳芳，应琦，张充，等. 重组脂肪氧合酶基因工程菌破碎条件优化及其酶活力测定方法研究［J］. 食品科学，2012，33(23)：160-165.
［8］孙健，杨志建，许国旺，等. 粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的分离提取［J］. 工业微生物，2006，36(1)：11-15.
［9］闻崇炜，刘瑞江，毛春友，等. 响应面分析法优化重组原动蛋白2β诱导条件的研究［J］. 生物技术通报，2012(5)：173-178.
［10］吴蕾，雷鸣，洪建辉，等. 超声破碎重组大肠杆菌释放包含体的过程研究［J］. 化学工业与工程，2002，19(6)：422-425.
［11］林莉萍，董墨思，解婉莹，等. α-半乳糖苷酶基因工程菌细胞破碎条件的筛选［J］. 农业科技与装备，2014，244(10)：37-39.
［12］Laemmli U K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4［J］. Nature，1970，227(5259)：680-685.
［13］闻崇炜，毛春友，胡萍萍，等. Tricine蛋白质电泳定量检测溶菌酶方法的研究［J］. 江苏农业科学，2012，40(5)：290-292.
［14］Sahoo M K，Sinha B，Marbaniang M，et al. Transition metal catalyzed mineralization of Calcon and bioassay of the mineralized solutions by Escherichia coli colony forming unit assay［J］. Chemical Engineering Journal，2012，209(41)：147-154.
［15］Zhukova L V，Kiwi J，Nikandrov V V. TiO2 nanoparticles suppress Escherichia coli cell division in the absence of UV irradiation in acidic conditions［J］. Colloids and Surfaces. B，Biointerfaces，2012，97(9)：240-247.
［16］邹如意，李妍，邹珍友，等. 用扫描电镜观察不镀导电膜对大肠杆菌损伤和图像的影响［J］. 安徽农业科学，2009，37(32)：15692-15693.
［17］Peternel S，Komel R. Isolation of biologically active nanomaterial (inclusion bodies) from bacterial cells［J］. Microbial Cell Factories，2010，9(1)：1-16.
［18］Srensen H P，Mortensen K K. Soluble expression of recombinant proteins in the cytoplasm of Escherichia coli［J］. Microbial Cell Factories，2005，4(1)：1.
［19］Martínez-Alonso M，Vera A，Villaverde A. Role of the chaperone DnaK in protein solubility and conformational quality in inclusion body-forming Escherichia coli cells［J］. FEMS Microbiology Letters，2007，273(2)：187-195.
［20］Mentel M，Iancu I，Szabo C Z K，et al. Co-expression of human WDR1 gene with a chaperone increases its protein solubility［J］. Romanian Journal of Biochemistry，2013(1)：39-51.
［21］Sabate R，De Groot N S，Ventura S. Protein folding and aggregation in bacteria［J］. Cellular and Molecular Life Sciences，2010，67(16)：2695-2715.

相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2016-05-04
基金项目：国家自然科学基金(编号：81573529)；江苏大学高级人才启动基金(编号：1281370001)；江苏省2015年度普通高校研究生实践创新计划(编号：SJLX15_0512)；江苏大学第14批大学生科研立项项目(编号：14A441)。
作者简介：赵烨清(1992—)，女，江苏南通人，硕士研究生，主要从事食源性功能肽的研发工作。E-mail：18796020517@163.com。
通信作者：闻崇炜，博士，副教授，主要从事食源性功能肽的研发工作。E-mail：wenchw@ujs.edu.cn。
更新日期/Last Update: 2017-10-05