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[1]李钰华,李爽,盖颖.毛白杨木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶PtoXTH35原核可溶性表达方法研究[J].江苏农业科学,2019,47(08):33-36.
　Li Yuhua,et al.Study on prokaryotic soluble expression method of xyloglucan endotransglycosylase/hydrolase Pto XTH35 in Populus tomentosa[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2019,47(08):33-36.
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毛白杨木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶PtoXTH35
原核可溶性表达方法研究(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第47卷
期数:
2019年第08期
页码:
33-36
栏目:
生物技术
出版日期:
2019-05-19

文章信息/Info

Title:
Study on prokaryotic soluble expression method of xyloglucan endotransglycosylase/hydrolase Pto XTH35 in Populus tomentosa
作者:
李钰华;  李爽;  盖颖
北京林业大学生物科学与技术学院/林木育种国家工程实验室，北京 100083
Author(s):
Li Yuhua; et al
关键词:
毛白杨; 木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶; 原核表达; 包涵体; 可溶性蛋白
Keywords:
-
分类号:
S792.117.01
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
从毛白杨中克隆得到木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶PtoXTH35基因，根据SignalIP在线软件预测蛋白信号肽，并分别构建至pET28a、pET32a、pGEX-4t-1、pMAL-c5e、pET 43.1a等5种原核表达载体，经双酶切和测序验证后转化至BL21(DE3)感受态，使用终浓度为0.4 mmol/L的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导其表达目的蛋白。经SDS-PAGE检测，结果表明5种载体均可表达目的蛋白，pET28a、pET32a、pGEX-4t-1等3种载体所表达蛋白均以包涵体的形式存在，而pMAL-c5e和pET 43.1a载体携带蛋白表达量高并且所表达蛋白50%为可溶性蛋白，实现了毛白杨PtoXTH35在原核表达系统中的高效可溶性表达，该试验为后续进一步研究毛白杨PtoXTH35的体外功能奠定了基础。
Abstract:
-

参考文献/References:

［1］Rose J K，Braam J，Fry S C，et al. The XTH family of enzymes involved in xyloglucan endotransglucosylation and endohydrolysis：current perspectives and a new unifying nomenclature［J］. Plant & Cell Physiology，2002，43(12)：1421-1435.
［2］Albersheim，P. Xyloglucans in the primary cell wall［M］. New York：Academic Press，1976：225-274.
［3］Smith R C，Fry S C. Endotransglycosylation of xyloglucans in plant cell suspension cultures［J］. Biochemical Journal，1991，279(Pt 2)：529-535.
［4］Geisler-Lee J，Geisler M，Coutinho P M，et al. Poplar carbohydrate-active enzymes：Gene identification and expression analyses［J］. Plant Physiology，2006，140(3)：946-962.
［5］杜丽萍，沈昕，陈少良，等. 细胞壁重构关键酶木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶(XTH)的研究进展［J］. 农业生物技术学报，2010，18(3)：604-609.
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相似文献/References:

[1]邹吉祥,金华,郭鹏,等.芽变毛白杨嫩枝扦插不定根发生过程中内源激素动态变化[J].江苏农业科学,2016,44(01):196.
　Zou Jixiang,et al.Dynamic changes of endogenous hormones during adventitious roots sprouting of tender branch cutting of bud mutation Populus tomentosa Carrs[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2016,44(08):196.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2018-01-15
基金项目：国家自然科学基金(编号：31300498)。
作者简介：李钰华(1992—)，女，山西临汾人，硕士研究生，主要从事生物化学与分子生物学研究。E-mail：liyuhua921216@163.com。
通信作者：盖颖，博士，副教授，主要从事生物化学与分子生物学研究。E-mail：gaiying@bjfu.edu.cn。
更新日期/Last Update: 2019-04-20