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[1]陈丹丹,刘宏波.筛选GPAT基因的酵母遗传互补体系的优化[J].江苏农业科学,2019,47(13):64-66.
　Chen Dandan,et al.Optimization of yeast genetic complementation system for screening GPAT gene[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2019,47(13):64-66.
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筛选GPAT基因的酵母遗传互补体系的优化(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第47卷
期数:
2019年第13期
页码:
64-66
栏目:
生物技术
出版日期:
2019-07-31

文章信息/Info

Title:
Optimization of yeast genetic complementation system for screening GPAT gene
作者:
陈丹丹;  刘宏波
浙江农林大学农业与食品科学学院，浙江杭州 311300
Author(s):
Chen Dandan; et al
关键词:
3-磷酸甘油酰基转移酶; 启动子; 酵母; 遗传互补
Keywords:
-
分类号:
Q344+.13；S188
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
3-磷酸甘油酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferase，GPAT)是甘油脂生物合成途径中催化第1步酰化反应的关键酶，参与生物体的不同代谢途径，发挥着不同的生理功能。本研究对已构建的GPAT基因酵母遗传互补筛选体系进行优化，通过替换酵母表达载体pYES2-Kan-yADH1 v1中ADH1启动子，增强目的基因的表达；同时，在酵母遗传转化后对菌株进行复苏培养，提高遗传转化效率，增加阳性菌落数目。该体系的优化将进一步提高GPAT酶的筛选效率。
Abstract:
-

参考文献/References:

［1］刘聪，肖旦望，施春霖，等. 植物GPATs基因研究进展［J］. 遗传，2013，35(12)：1352-1359.
［2］刘继梅，陈善娜，鄢波，等. 不同抗冷性水稻中编码甘油-3-磷酸转酰酶的部分cDNA的序列比较研究［J］. 云南植物研究，2000(3)：317-321.
［3］Zheng Z，Xia Q，Dauk M，et al. Arabidopsis AtGPAT1，a member of the membrane-bound glycerol-3-phosphate acyltransferase gene family，is essential for tapetum differentiation and male fertility［J］. The Plant Cell，2003，15(8)：1872-1887.
［4］Zheng Z F，Zou J T. The initial step of the glycerolipid pathway-identification of glycerol 3-phosphate/dihydroxyacetone phosphate dual substrate acyltransferases in Saccharomyces cerevisiae［J］. Journal of Biological Chemistry，2001，276(45)：41710-41716.
［5］Lewin T M，Wang P，Coleman R A. Analysis of amino acid motifs diagnostic for the sn-Glycerol-3-phosphate acyltransferase reaction［J］. Biochemistry，1999，38(18)：5764.
［6］Lindner S E，Sartain M J，Hayes K，et al. Enzymes involved in plastid-targeted phosphatidic acid synthesis are essential for Plasmodium yoelii liver-stage development［J］. Molecular Microbiology，2014，91(4)：679-693.
［7］Lei J，Miao Y C，Lan Y，et al. A novel complementation assay for quick and specific screen of genes encoding glycerol-3-phosphate acyltransferases［J］. Frontiers in Plant Science，2018，9：353.
［8］Ammerer G. Expression of genes in yeast using the ADCI promoter［J］. Methods in Enzymology，1983，101：192-201.
［9］Demarini D J，Carlin E M，Livi G P. Constitutive promoter modules for PCR-based gene modification in Saccharomyces cerevisiae［J］. Yeast，2001，18(8)：723-728.
［10］秦丽娜，江贤章，田宝玉，等. 酿酒酵母乙醇脱氢酶Ⅰ基因的超表达［J］. 微生物学通报，2008(2)：261-266.
［11］Ruohonen L，Penttil M，Kernen S. Optimization of Bacillus a-mylase production by Saccharomyces cerevisiae［J］. Yeast，2010，7(4)：337-346.
［12］Ruohonen L，Aalto M K，Keranen S. Modifications to the ADH1 promoter of Saccharomyces cerevisiae for efficient production of heterologous proteins［J］. Journal of Biotechnology，1995，39(3)：193-203.
［13］Santangelo G M，Tornow J. Efficient transcription of the glycolytic gene ADH1 and three translational component genes requires the GCR1 product，which can act through TUF/GRF/RAP binding sites.［J］. Molecular and Cellular Biology，1990，10(2)：859-862.
［14］张怡，李成伟. 酵母异源功能互补在植物基因克隆中的应用［J］. 生物技术通报，2010(7)：14-21.
［15］Vainio A I. Effect of upstream sequences of the ADH1 promoter on the expression of Hormoconis resinaeglucoamylase P by Saccharomyces cerevisiae［J］. FEMS Microbiology Letters，1994，121(2)：229-235.
［16］李蔚，李育阳. 酵母ADH2-SUC2融合启动子的构建及其对基因表达的调控［J］. 遗传学报，1997(6)：561-568.
［17］金晓媚，马雁冰. 用于异源基因表达的毕赤酵母启动子研究进展［J］. 微生物学杂志，2015(3)：71-74.
［18］彭雷，赵艳，马银花. 褐飞虱组蛋白H3与H2A基因启动子克隆与序列分析［Ｊ］. 江苏农业科学，２０１７，４５（２３）：３０-３２.
［19］熊冬琴，黄子栋，彭琦，等. 甘蓝型油菜ALS基因启动子克隆及其瞬时表达分析［J］. 江苏农业科学，2018，46(23)：60-65.
［20］李兵，庄国强，林建强，等. 纤维素酶基因在毕赤酵母中的拷贝数对其表达的影响［J］. 生物加工过程，2006，4(4)：12-16.

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[1]张婷婷,马磊.枯草杆菌启动子P43及Pamy的转录活性[J].江苏农业科学,2014,42(12):56.
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　Hua Zhaohui,et al.Cloning and functional analysis of promoter pBnaC05g31880D from rapeseed (Brassica napus L.)[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2020,48(13):65.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2019-01-26
基金项目：国家自然科学基金面上项目(编号：31370287)；农业部“948”项目(编号：2014-Z30)。
作者简介：陈丹丹(1993—)，女，安徽六安人，硕士研究生，主要从事植物油脂代谢与生理生化研究。Tel：(0571)61100162；E-mail：2267664814@qq.com。
通信作者：刘宏波，博士，副教授，主要从事植物油脂代谢与生理生化研究。E-mail：hbliu@zafu.edu.cn。
更新日期/Last Update: 2019-07-05