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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第47卷

期数:

2019年第23期

页码:

190-194

栏目:

畜牧兽医与水产蚕桑

出版日期:

2019-12-30

文章信息/Info

Title:

A optimized method and its verification for isolation of porcine follicle granulosa cells

作者:

曲小露¹; 2;  施振旦²;  李辉²

1.吉林农业大学动物科技学院，吉林长春 130118；
2.江苏省农业科学院畜牧研究所/动物品种改良与繁育重点实验室，江苏南京 210014

Author(s):

Qu Xiaolu; et al

关键词:

颗粒细胞; FICOLL-Paque; 细胞增殖; 孕酮; 免疫荧光染色; FSH受体

Keywords:

-

分类号:

S828.3

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

目前，进行体外研究的卵泡颗粒细胞主要通过抽取卵泡液的方式获得。而笔者前期研究发现，通过该方式获得的颗粒细胞贴壁率低且活力差。为解决该问题，在抽取方式的基础上采用FICOLL-Paque分离液对细胞进行进一步纯化，并通过CCK-8、Western Blot、免疫荧光染色、QRT-PCR、ELISA等方法分别对纯化细胞的形态、增殖能力、激素分泌相关受体(FSHR、LHCGR)和基因(CYP19A1、CYP11A1、StAR)的表达及激素分泌情况进行检测。结果发现，经纯化的细胞贴壁能力、细胞形态和增殖能力明显改善，且各激素分泌相关基因都有表达；E2分泌量明显提高，而P4分泌明显降低。研究结果表明，经FICOLL-Paque分离液纯化后的猪卵泡颗粒细胞中黄体化的颗粒细胞被大部分清除，纯化后的细胞活力更好且更能体现出颗粒细胞的特性。

Abstract:

-

参考文献/References:

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相似文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2018-08-16
基金项目：国家自然科学基金(编号：31402080)；江苏省自然科学基金(编号：BK20151365)。
作者简介：曲小露(1993—)，男，山东东营人，硕士研究生，主要从事动物繁殖方面研究。E-mail：qquuxxiiaaoolluu@163.com。
通信作者：李辉，博士，副研究员，主要从事动物繁殖方面研究。E-mail：lhlydk@126.com。

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更新日期/Last Update: 2019-12-05