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[1]王小蓓,王秀静,李丽霞.潮间带大型海藻小珊瑚藻蛋白质提取方法及双向电泳体系优化[J].江苏农业科学,2020,48(09):72-77.
　Wang Xiaobei,et al.Optimization of protein extraction method and two-dimensional electrophoresis of Corallina pilulifera[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2020,48(09):72-77.
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潮间带大型海藻小珊瑚藻蛋白质提取方法
及双向电泳体系优化(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第48卷
期数:
2020年第09期
页码:
72-77
栏目:
生物技术
出版日期:
2020-05-05

文章信息/Info

Title:
Optimization of protein extraction method and two-dimensional electrophoresis of Corallina pilulifera
作者:
王小蓓;  王秀静;  李丽霞
烟台大学生命科学学院，山东烟台 264005
Author(s):
Wang Xiaobei; et al
关键词:
小珊瑚藻; 双向电泳; 蛋白质; 提取方法
Keywords:
-
分类号:
Q947
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
为建立适用于潮间带大型海藻小珊瑚藻(Corallina pilulifera)蛋白质组学分析的样品制备方法，分别用饱和酚抽提法、三氯乙酸(TCA)-丙酮沉淀法、Trizol提取蛋白法、Biozol提取蛋白法、饱和硫酸铵沉淀法对蛋白质进行提取，筛选出小珊瑚藻蛋白质提取的最优方法，并从胶条pH值和分离胶浓度探究双向电泳系统的优化条件。结果表明，在胶条pH值为4~7和分离胶浓度为12.5%条件下，并使用饱和酚抽提法提取蛋白质，所提取蛋白质不仅浓度高且纯度较高，因而可获得稳定清晰、蛋白质点数较多的双向电泳图谱。该体系可为红藻门大型海藻的蛋白质组学分析提供重要的技术参考。
Abstract:
-

参考文献/References:

［1］Cuder B，Bell D J，Birrell H C，et al. An integrated proteomic approach to studying glomerular nephrotoxicity［J］. Electrophoresis，1999，20(18)：3647-3658.
［2］Grg A，Obermaier C，Boguth G，et al. The current state of two-dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients［J］. Electrophoresis，2000，21(6)：1037-1053.
［3］程华民，杨婷寒，项楠，等. 不同方法提取珊瑚总蛋白质的比较［J］. 热带生物学报，2017，8(2)：225-231.
［4］王会芳，颜海波，杜虹. 大型海藻龙须菜蛋白提取及双向电泳体系的优化［J］. 汕头大学学报(自然科学版)，2013，28(4)：34-39，80.
［5］Zou H X，Pang Q Y，Zhang A Q，et al. Excess copper induced proteomic changes in the marine brown algae Sargassum fusiforme［J］. Ecotoxicology and Environmental Safety，2015，111：271-280.
［6］王仁君，唐学玺，孙俊华. 小珊瑚藻对赤潮异弯藻的化感效应［J］. 应用生态学报，2008，19(10)：2322-2326.
［7］刘广发，林均民，林枫. 小珊瑚藻藻红蛋白提取及其稳定性研究［J］. 海洋科学，2006，30(11)：23-27.
［8］徐智广，李美真，霍传林，等. 高浓度CO2引起的海水酸化对小珊瑚藻光合作用和钙化作用的影响［J］. 生态学报，2012，32(3)：699-705.
［9］郑仰桥. CO2浓度和阳光紫外辐射变化对珊瑚藻生理生化的影响［D］. 汕头：汕头大学，2009.
［10］Wang W，Scali M，Vignani R，et al. Protein extraction for two-dimensional electrophoresis from olive leaf，a plant tissue containing high levels of interfering compounds［J］. Electrophoresis，2003，24(14)：2369-2375.
［11］Giavalisco P，Nobrdhoff E，Lehrdc H. Extration of proteins from plant tissues for two-dimensional electrophoresis analysis［J］. Electrophoresis，2003，24(1/2)：207-216.
［12］Lee F F，Lo S L. The use of Trizol reagent(phenol/guanidine isothiocyanate for producing high quality two-dimensional gel electrophoretograms(2-DE)of dinoflagellates［J］. Journal of Microbiological Methods，2008，73(1)：26-32.
［13］叶翠芳，杨珂，张美英，等. 藻胆蛋白的提取、纯化及其体外抗紫外活性［J］. 暨南大学学报(自然科学与医学版)，2013，34(5)：522-526.
［14］Bradford M M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding［J］. Analytical Biochemistry，1976，72(1)：248-254.
［15］Xie C J，Wang D，Yang X Y. Protein extraction methods compatible with proteomic analysis for thecotton seedling［J］. Crop Science，2009，49(2)：395-402.
［16］Wang D Z，Lin L，Leo L C，et al. Comparative studies of four protein preparation methods for proteomic study of the dinoagellate Alexandrium sp. using two-dimensional electrophoresis［J］. Harmful Algae，2009，8(5)：685-691.
［17］Wang W，Vignani R，Scali M，et al. A universal and rapid protocol for protein extraction from recalcitrant plant tissues for proteomic analysis［J］. Electrophoresis，2006，27(13)：2782-2786.
［18］Morgan K C，Wright J C，Simpson F J. Review of chemical constituents of the red alga Palmaria palmate(dulse)［J］. Economic Botany，1980，34(1)：27-50.
［19］闰秋丽，郭兴凤. 海藻蛋白研究及应用进展［J］. 食品研究与开发，2008，29(1)：179-1812.
［20］高坤山. 珊瑚藻类钙化的研究［J］. 海洋与湖沼，1999，30(3)：290-294.
［21］赵宇鹏，周伟，赵佩佩，等. 适用于条斑紫菜的双向电泳样品制备方法［J］. 海洋科学，2013，37(5)：19-24.
［22］梁文裕，王星，焦广飞，等. 发菜蛋白质组双向电泳技术的建立及优化［J］. 西北植物学报，2009，9(8)：1550-1556.
［23］杨德明，张娅欣，沈少炎，等. 福建柏叶片蛋白质双向电泳技术优化［J］. 森林与环境学报，2017，37(1)：54-59.

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备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2019-05-20
基金项目：国家自然科学基金青年科学基金(编号：31300326)。
作者简介：王小蓓(1994—)，女，山东淄博人，硕士研究生，主要从事藻类生理生态抗逆研究。E-mail：965679923@qq.com。
通信作者：李丽霞，博士，副教授，硕士生导师，主要从事藻类生态抗逆学。E-mail：lilixianet@126.com。
更新日期/Last Update: 2020-05-05