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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第48卷

期数:

2020年第20期

页码:

178-182

栏目:

畜牧兽医与水产蚕桑

出版日期:

2020-10-20

文章信息/Info

Title:

Preparation of neutralizing monoclonal antibody for distinguishing virulent and attenuated canine distemper virus strains

作者:

毕振威¹; 徐立波²; 夏兴霞¹; 梁霆³; 王永山¹

1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏南京 210014；
2.山东省招远市农业农村局，山东招远 265400； 3.江苏省农业农村厅，江苏南京 210036

Author(s):

Bi Zhenwei; et al

关键词:

犬瘟热病毒; 单克隆抗体; 流行毒株; 疫苗毒株; 鉴别检测

Keywords:

-

分类号:

S852.65

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

为了制备鉴别犬瘟热病毒(CDV)流行强毒株和疫苗弱毒株的单克隆抗体，将CDV 851弱毒株浓缩后经蔗糖密度梯度离心纯化，免疫BALB/c小鼠，取免疫小鼠脾细胞与SP2/0瘤细胞进行细胞融合，经3~5次克隆，间接ELISA筛选，获得稳定分泌抗CDV的杂交瘤细胞2D12株。该细胞株分泌的单克隆抗体亚类为IgG1κ，与常见犬病毒不发生交叉反应。间接免疫荧光显示，单克隆抗体与CDV 851毒株发生特异性反应，与杆状病毒表达的CDV 851毒株H蛋白发生特异性反应。Western blot检测发现，单克隆抗体与2株CDV强毒株H蛋白不发生反应，而与2株CDV弱毒株H蛋白有特异性反应。双抗体夹心ELISA显示，单克隆抗体能检测CDV疫苗弱毒株而不能检测CDV强毒株。病毒中和试验证实，单克隆抗体对CDV 851弱毒株具有中和能力。制备了区分CDV强毒株和疫苗弱毒的单克隆抗体，为CDV的鉴别诊断技术研究奠定了基础。

Abstract:

-

参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2020-06-23
基金项目：国家重点研发计划(编号：2016YFD0501000)；国家自然科学基金(编号：31802168)。
作者简介：毕振威(1985—)，男，山东文登人，博士，助理研究员，主要从事动物疫病防控研究。E-mail：bizhenwei@126.com。
通信作者：王永山，博士，研究员，主要从事兽医微生物学与免疫学研究。E-mail：wangys63@126.com。

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更新日期/Last Update: 2020-11-09