|本期目录/Table of Contents|

[1]肖琦,蒋彩霞,史慧,等.非洲猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及4种检测试剂盒的比较[J].江苏农业科学,2021,49(2):119-124.
 Xiao Qi,et al.Establishment of real-time PCR of African swine fever virus and comparison of four detection kits[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2021,49(2):119-124.
点击复制

非洲猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及4种检测试剂盒的比较(PDF)
分享到:

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第49卷
期数:
2021年第2期
页码:
119-124
栏目:
畜牧兽医与水产蚕桑
出版日期:
2021-01-20

文章信息/Info

Title:
Establishment of real-time PCR of African swine fever virus and comparison of four detection kits
作者:
肖琦1 蒋彩霞2 史慧3 赵霞玲14 钱雯娴14 朱家平14 张冯禧14 温立斌1 汪伟1 何孔旺1
1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏南京 210014;2.江苏省镇江市动物疫病预防控制中心,江苏镇江 212003;3.江苏省连云港市畜牧兽医站,江苏连云港 222001; 4.西藏农牧学院,西藏林芝 860000
Author(s):
Xiao Qiet al
关键词:
非洲猪瘟病毒检测荧光定量PCR灵敏性稳定性敏感性
Keywords:
-
分类号:
S852.65+1
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
为评估目前常用商品化非洲猪瘟荧光定量PCR检测试剂盒,参考OIE推荐的非洲猪瘟病毒(ASFV)荧光定量PCR方法合成引物和探针,建立非洲猪瘟病毒qPCR检测方法(OIE-qPCR);并与市面4种ASFV检测试剂盒进行了比较。以人工合成的ASFV p72基因TA克隆重组质粒为阳性标准品,OIE-qPCR可以检测到10~102 copies;而4种ASFV荧光定量PCR检测试剂盒中,进口试剂盒TF-qPCR能检测到10 copies,进口试剂盒ID-qPCR和国产试剂盒QD-qPCR能检测到10~102 copies,而国产试剂盒LY-qPCR能检测到102 copies。对健康猪组织样及临床模拟样品的检测结果显示:OIE-qPCR与4种检测试剂盒之间的符合率为92.60%~99.03%。其中,阳性样品CT值的相关系数为0.988~0.997(Perason法),表明各试剂盒之间相关性良好;但在检测病毒核酸含量较低的样品时,各试剂盒结果之间存在一定差异,其中,TF-qPCR试剂盒显示更高的阳性检出率,ID-qPCR试剂盒和LY-qPCR试剂盒次之。本研究为临床选用非洲猪瘟病毒快速检测试剂盒提供了依据。
Abstract:
-

参考文献/References:

[1]Zhou X,Li N,Luo Y,et al. Emergence of African swine fever in China,2018[J/OL]. Transboundary and Emerging Diseases,2018 Aug 13.doi:10.1111/tbed.12989.[Epub ahead of print]
[2]Woonwong Y,do Tien D,Thanawongnuwech R. The Future Of The Pig Industry After The Introduction of African swine fever into Asia[J]. Animal Frontier,2020,10(4):30-37.
[3]张丽,罗玉子,王涛,等. 非洲猪瘟诊断技术发展现状与需求分析[J]. 中国农业科技导报,2019,21(9):1-11.
[4]于康震,张仲秋,冯忠武,等. OIE陆生动物诊断试验与疫苗手册(哺乳动物、禽类与蜜蜂)下卷[M]. 7版.世界动物卫生组织(OIE),2012:1198.
[5]Beltran A D,Aris M,Gallardo C,et al. 非洲猪瘟:发现与诊断-兽医指导手册[M]. 罗马:联合国粮食及农业组织(FAO),2018:7.
[6]Montgomery R E. On a form of swine fever occurring in British East Africa(Kenya Colony)[J]. Journal of Comparative Pathology and Therapeutics,1921,34:159-191.
[7]农业农村部. 农业农村部回应非洲猪瘟疫情防控情况[J]. 北方牧业,2020(21):16.
[8]Wardley R C,Hamilton F,Wilkinson P J. The replication of virulent and attenuated strains of African swine fever virus in porcine macrophages[J]. Archives of Virology,1979,61(3):217-225.
[9]Bool P,Ordas A,Sachez-Botija C. El diagnostico de la peste porcina African por immunofluorescencia[J]. Bullutin of International Epizoot,1969,72:819-839.
[10]吴海涛,成大荣,吴萌,等. 非洲猪瘟病毒胶体金免疫层析试纸条的研制[J]. 黑龙江畜牧兽医,2018(17):126-128,238.
[11]Agüero M,Fernández J,Romero L,et al. Highly sensitive PCR assay for routine diagnosis of African swine fever virus in clinical samples[J]. Journal of Clinial Microbiology,2003,41(9):4431-4434.
[12]King D P,Reid S M,Hutchings G H,et al.Development of a TaqMan PCR assay with internal amplification control for the detection of African swine fever virus [J]. Journal of Virological Methods,2003,107(1):53-61.
[13]李维彬,蒋正军,王玉炯,等. 非洲猪瘟病毒TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 宁夏大学学报(自然科学版),2007,28(1):56-59.
[14]张泉,朱鸿飞,孙怀昌. 非洲猪瘟病毒常规PCR及Real-time PCR检测方法的建立[J]. 中国预防兽医学报,2007,29(6):458-460.
[15]吴亚楠,朱潇静,周博伦,等.非洲猪瘟病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 中国兽医学报,2020,40(5):888-891,896.
[16]杜楠楠,高飞,姜一峰,等. 非洲猪瘟TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用[J]. 中国兽医科学,2020,50(4):423-429.
[17]王建昌,王金凤,刘立兵,等.非洲猪瘟病毒RPA等温检测方法的建立[J]. 中国动物检疫,2016,33(7):78-81,94.

相似文献/References:

[1]张永江,辛言言,李桂芬,等.实时荧光RT-PCR方法检测马铃薯V病毒[J].江苏农业科学,2013,41(06):36.
 Zhang Yongjiang,et al.Detection of potato virus V by real-time fluorescent RT-PCR[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(2):36.
[2]杨怀君,阎洪山,卢勇涛,等.乌斯特智能在线检测控制系统试验分析[J].江苏农业科学,2014,42(09):287.
 Yang Huaijun,et al.Experimental analysis of Uster intelligent online detection and control system[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(2):287.
[3]郭凤柳,熊蕊,刘晓慧,等.肉制品中驴源性成分PCR方法的建立及应用[J].江苏农业科学,2014,42(08):35.
 Guo Fengliu,et al.Establishment and application of PCR method for donkey derived ingredients in meat productsGuo Fengliu,et al[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(2):35.
[4]冯才伟,冯月君,崔海峰,等.呋喃它酮代谢物化学发光试剂盒的建立[J].江苏农业科学,2013,41(09):277.
 Feng Caiwei,et al.Establishment of chemiluminescence assay kit of furaltadone metabolite[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(2):277.
[5]刘健,张德咏,张松柏,等.湖南和福建辣椒上辣椒脉斑驳病毒的检测及系统发育分析[J].江苏农业科学,2016,44(05):184.
 Lu Jian,et al.Detection and phylogenetic analysis of chilli veinal mottle virus infected pepper in Hunan and Fujian provinces[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2016,44(2):184.
[6]宋丰顺,倪大虎,倪金龙,等.杂交水稻种子纯度检测方法综述[J].江苏农业科学,2016,44(06):6.
 Song Fengshun,et al.Study on detection methods of seed purity of hybrid rice:a review[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2016,44(2):6.
[7]赵永前,孙华伟,张敬峰,等.某进口原种猪场仔猪猪瘟首免日龄的确定与分析[J].江苏农业科学,2016,44(06):354.
 Zhao Yongqian,et al.Confirmation and analysis of date of initial immunization for piglet with swine fever virus vaccine in an import original breeding farm[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2016,44(2):354.
[8]张文志,鲁绯,闫红.酱油中抗草甘膦大豆转基因多种成分的检测:实时荧光定量PCR和传统PCR的比较[J].江苏农业科学,2016,44(06):372.
 Zhang Wenzhi,et al.Detection of Roundup ready transgenic components in soy sauce:comparison of real-time fluorescence quantitative PCR and traditional PCR[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2016,44(2):372.
[9]胡乐琴,吴春燕,杨秀文,等.微囊藻毒素ELISA检测方法的建立与评估[J].江苏农业科学,2015,43(09):340.
 Hu Leqin,et al.Establishment and evaluation of ELISA detection method of microcystic toxins[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2015,43(2):340.
[10]钱正.农业质检机构的检测质量控制和开展新项目的方法确认[J].江苏农业科学,2015,43(06):271.
 Qian Zheng.Quality control of agricultural quality inspection institutions and methods for creating new projects[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2015,43(2):271.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期:2020-11-13
基金项目:江苏省现代农业(生猪)产业技术体系生物安全创新团队项目(编号:JATS[2019]403)。
作者简介:肖琦(1980—),女,辽宁丹东人,博士,助理研究员,主要从事猪病及人兽共患病防控研究。E-mail:xiaoqi_2122@163.com。
通信作者:何孔旺,研究员,主要从事猪病及人兽共患病防控研究。E-mail:kwh2003@263.net。
更新日期/Last Update: 2021-01-20