«上一篇/Previous Article|本期目录/Table of Contents|下一篇/Next Article»

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第50卷

期数:

2022年第5期

页码:

23-28

栏目:

生物技术

出版日期:

2022-03-05

文章信息/Info

Title:

Development of a duplex real-time PCR method for detection of genetically modified components Cry1A(c) and CP4-EPSPS in crops

作者:

罗建兴¹; 2; 3;  刘国强¹; 2; 3;  其勒木格¹; 2;  郭梁¹; 2; 3

1.锡林郭勒职业学院，内蒙古锡林浩特 026000； 2.锡林郭勒生物工程研究院，内蒙古锡林浩特 026000；3.锡林郭勒食品检验检测和风险评估中心，内蒙古锡林浩特 026000

Author(s):

Luo Jianxing; et al

关键词:

转基因; Cry1A(c)基因; CP4-EPSPS基因; 双重实时荧光PCR; 特异性; 检出限; 模拟掺假

Keywords:

-

分类号:

TS207.3

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

采用羧基荧光素(FAM)和六氯荧光素(HEX)荧光基团标记探针，建立针对农作物中常见抗虫和抗除草剂基因的双重实时荧光PCR检测方法，通过特异性、检出限以及模拟掺假试验验证此方法在转基因检测中的适用性。特异性检测试验中仅转基因作物(转基因棉花、转基因水稻、转基因大豆)和阳性质粒检测出相应转基因成分，其余样品均未出现明显PCR扩增曲线；检出限结果表明，双重实时荧光PCR方法对Cry1A(c)、CP4-EPSPS基因的检出限分别为1、0.1 ng，所建立的标准曲线r²值均大于0.98，具有对农作物中的转基因成分进行定量检测的能力；模拟掺假检测显示此方法可检测到1%的Cry1A(c)和5%的CP4-EPSPS转基因成分。综上所述，本试验建立的双重实时荧光PCR法适用于对Cry1A(c)和CP4-EPSPS转基因成分的快速检测和定量分析。

Abstract:

-

参考文献/References:

［1］顾爱国，王伟，张晓强，等. 转基因食品检测技术的研究进展［J］. 江苏农业科学，2006，34(3)：180-183.
［2］励建荣.转基因食品的优点和安全性［J］. 食品工业科技，2002，23(4)：71-73.
［3］赵雨佳，范培蕾，梁亮，等. 转基因作物的发展与检测分析［J］. 计量技术，2019(10)：54-57.
［4］Luthy J. Detection strategies for food authenticity and genetically modified foods［J］. Food Control，1999，10(6)：359-361.
［5］樊振江，孟楠.转基因食品的安全性及优点［J］. 食品安全导刊，2017(3)：35-36.
［6］沈泓，李超，李珏.分子生物学技术在转基因食品检测领域中的研究进展［J］. 中国农业信息，2017(15)：57-59，61.
［7］国际农业生物技术应用服务组织. 2018年全球生物技术/转基因作物商业化发展态势［J］中国生物工程杂志，2019，39(8)：1-6.
［8］张振铎.转基因食品质量安全检测技术的发展研究［J］. 现代食品，2019(24)：135-137，148.
［9］宋欢，王坤立，许文涛，等. 转基因食品安全性评价研究进展［J］. 食品科学，2014，35(15)：295-303.
［10］王立平，王东，龚熠欣，等. 国内外转基因农产品食用安全性研究进展与生产现状［J］. 中国农业科技导报，2018，20(3)：94-103.
［11］贾士荣，金芜军.国际转基因作物的安全性争论：几个事件的剖析［J］. 农业生物技术学报，2003，11(1)：1-5.
［12］Losey J E，Rayor L S，Carter M E.Transgenic pollen harms monarch larvae［J］. Nature，1999，399(6733)：214.
［13］李夏莹，高鸿飞，刘鹏程，等. 转基因作物快速检测技术的研究进展［J］. 江苏农业科学，2018，46(3)：5-9.
［14］梁晋刚，徐俊锋，焦悦，等. 转基因作物快速检测技术进展与展望［J］. 江苏农业科学，2019，47(21)：71-74.
［15］罗建兴，海小，刘国强，等. 利用实时荧光定量PCR法检测食品中鹌鹑源性成分［J］. 食品研究与开发，2019，40(3)：177-183.
［16］杨镇州，刘刚，梁文. 转基因大豆MON89788芯片式数字PCR定量方法的建立［J］. 生物技术通报，2020，36(5)：68-73.
［17］李永进，熊涛，吴华伟，等. 利用可视化膜芯片检测9种转基因玉米［J］. 湖北农业科学，2016，55(11)：2926-2929.
［18］刘国强，海小，罗建兴，等. 基于TaqMan实时荧光PCR检测植物中转基因成分［J］. 农业与技术，2020，40(10)：4-9.
［19］吴洪福，郭淑元，李海涛，等. 苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白结构和功能研究进展［J］. 东北农业大学学报，2009，40(2)：118-122.
［20］郭文芳，王楠，李刚强，等. CP4-EPSPS转基因棉花植株鉴定方法比较分析［J］. 生物技术通报，2017，33(4)：114-118.
［21］转基因产品检测实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测方法：GB/T 19495.4—2018［S］.
［22］James C. Global status of commercialized Biotech/GM crops in 2017［J］. ISAAA Briefs，2017(35)：53.
［23］吴姗，吴志毅，张晓峰，等. 普通PCR法、荧光定量PCR法及微流控芯片法检测大豆产品中外源基因灵敏度的比较［J］. 中国食品学报，2009，9(2)：176-186.
［24］王颖，任志莹，陈芳芳.应用普通PCR与实时荧光标记PCR技术检测玉米子粒中转基因成分的比较［J］. 玉米科学，2016，24(5)：43-48.
［25］尹全，李忆，宋君，等. 多重PCR筛查检测进口转基因玉米［J］. 核农学报，2016，30(6)：1045-1053.

相似文献/References:

[1]陈旭升,狄佳春,赵亮.转基因抗虫杂交棉“星杂棉168”品种特性分析[J].江苏农业科学,2014,42(11):126.
　Chen Xusheng,et al().Characteristics of transgenic hybrid cotton cultivar “Xingzamian 168” with insect-resistance[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(5):126.
[2]张维,高朝宝,尹秀,等.棉蚜V-ATPase-A基因RNAi载体的构建及其在转基因拟南芥的基因表达[J].江苏农业科学,2013,41(10):17.
　Zhang Wei,et al.RNAi vector construction of V-ATPase-A gene from Aphis gossypii and its expression in transgenic Arabidopsis thaliana[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(5):17.
[3]田富强.产业化带动产学研合作转基因技术创新[J].江苏农业科学,2013,41(11):450.
　Tian Fuqiang.Production-education-research cooperative innovation in transgenic technology driven by industrialization[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(5):450.
[4]高莉.专利法视阈下转基因农产品安全保障的三重维度[J].江苏农业科学,2013,41(12):439.
　Gao Li.Triple dimensions of tansgenic sagety for agricultural products under the perspective of patent law[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(5):439.
[5]奈婕菲,程玉祥.一个杨树GDSL基因组织表达的特性及其在拟南芥异源的表达[J].江苏农业科学,2014,42(03):16.
　Nai Jiefei,et al.Tissue expression of a poplar GDSL gene and its heterologous expression analysis in Arabidopsis thaliana[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(5):16.
[6]蔡立旺,施庆华,高进,等.转基因抗虫杂交棉苏棉29栽培技术规程[J].江苏农业科学,2015,43(05):70.
　Cai Liwang,et al.Cultivation technology regulation of transgenic hybrid cotton cultivar “Sumian 29” with insect resistance[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2015,43(5):70.
[7]蔡立旺,潘群斌,施庆华,等.转基因杂交棉花新品种苏棉29的选育与栽培技术[J].江苏农业科学,2014,42(07):104.
　Cai Liwang,et al.Breeding and cultivation techniques of a new transgenic cotton hybrid “Sumian 29”[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(5):104.
[8]焦展,安胜军,邵铁梅,等.油葵嫁接及其在离体培养和转基因中的应用[J].江苏农业科学,2016,44(07):143.
　Jiao Zhan,et al.Grafting techniques of oil sunflower (Helianthus annuus L.) and its application in tissue culture and gene transformation[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2016,44(5):143.
[9]阮先乐,张杰.转基因成分的检测方法综述[J].江苏农业科学,2017,45(05):12.
　Ruan Xianle,et al.Detection methods of genetically modified components：a review[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2017,45(5):12.
[10]孙静,沙伟,张梅娟,等.转砂藓RcMYB基因烟草的抗旱生理指标测定[J].江苏农业科学,2017,45(12):62.
　Sun Jing,et al.Determination of drought resistance physiological index of tobacco with RcMYB gene[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2017,45(5):62.

备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2021-04-16
基金项目：锡林郭勒职业学院重点科研项目(编号：ZD-2020-04、ZD-2019-01)。
作者简介：罗建兴(1993—)，男，陕西榆林人，主要从事食品安全检测和风险评估及转基因成分检测研究。E-mail：ljxylyh@126.com。
通信作者：郭梁，博士，主要从事转基因成分检测和动物源性成分检测以及微生物资源开发研究。E-mail：herdman86@163.com。

常用功能

更新日期/Last Update: 2022-03-05