|本期目录/Table of Contents|

[1]夏瑾华,李丹丹,李然,等.怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白2A-like基因克隆及其功能分析[J].江苏农业科学,2023,51(2):36-43.
　Xia Jinhua,et al.Gene cloning and function analysis of tobamovirus multiplication protein 2A-like gene of Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg in Huaiyushan[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2023,51(2):36-43.
点击复制

怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白2A-like基因克隆及其功能分析(PDF)
分享到：

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第51卷
期数:
2023年第2期
页码:
36-43
栏目:
生物技术
出版日期:
2023-01-20

文章信息/Info

Title:
Gene cloning and function analysis of tobamovirus multiplication protein 2A-like gene of Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg in Huaiyushan
作者:
夏瑾华1; 2; 3; 4; 李丹丹1; 李然1; 刘贤泥1; 刘子捷1; 罗冰1; 欧丽佳1
1.上饶师范学院生命科学学院，江西上饶 334001； 2.上饶农业技术创新研究院，江西上饶 334001；3.上饶市药食同源植物资源保护与利用重点实验室，江西上饶 334001； 4.上饶市三叶青保育与利用技术创新中心，江西上饶 334001
Author(s):
Xia Jinhua; et al
关键词:
怀玉山三叶青; 烟草病毒增殖蛋白2A-like; 基因克隆; 表达分析; 亚细胞定位
Keywords:
-
分类号:
R284.2
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
通过怀玉山三叶青试管苗转录组数据库筛选得到怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白2A-like基因的核心片段，利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术克隆怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白2A-like基因，并对其进行序列分析、亚细胞定位和器官表达分析。结果表明，怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白2A-like基因cDNA总长度为828 bp，G+C 含量为46.50%；怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白2A-like由275个氨基酸组成，分子量为 30 728.97 u，等电点为5.39，为疏水性蛋白；二级结构由α-螺旋(28.36%)、β-片层(20.73%)、无规则卷曲(5091%) 构成；三级结构为单体跨膜蛋白；预测怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白2A-like主要存在液泡膜中；怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白2A-like与葡萄烟草病毒增殖蛋白2A(GenBank：XP_034708140.1、XP_002279170.2)的同源性最高，同源性达到86.79%。通过烟草叶片亚细胞定位分析表明，烟草病毒增殖蛋白2A-like定位于细胞质和细胞核中。实时定量PCR结果显示，烟草病毒增殖蛋白2A-like基因在怀玉山三叶青2个栽培种中的表达存在器官特异性，怀玉2号和怀玉1号均在叶中表达量最高。怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白2A-like具有典型烟草病毒增殖蛋白2A的结构特征，氨基酸序列及核酸序列与同源物种相似度较高，进化上较为保守，且可降低植株的光合作用效率。
Abstract:
-

参考文献/References:

［1］林国卫，闻静，石光禹，等. 侵染怀玉山三叶青的病毒RT-PCR鉴定［J］. 分子植物育种，2020，18(3)：968-975.
［2］孙永，李红艳，刘小如，等. 动态超高压微射流技术在三叶青叶黄酮的提取中的应用［J］. 食品工业科技，2013，34(2)：273-276.
［3］Sun Y，Hui Q R，Chen R，et al. Apoptosis in human hepatoma HepG2 cells induced by the phenolics of Tetrastigma hemsleyanum leaves and their antitumor effects in H22 tumor-bearing mice［J］. Journal of Functional Foods，2018，40：349-364.
［4］Sun Y，Qin Y，Li H Y，et al. Rapid characterization of chemical constituents in Radix Tetrastigma，a functional herbal mixture，before and after metabolism and their antioxidant/antiproliferative activities［J］. Journal of Functional Foods，2015，18：300-318.
［5］Sun Y，Tsao R，Chen F，et al. The phytochemical composition，metabolites，bioavailability and in vivo antioxidant activity of Tetrastigma hemsleyanum leaves in rats［J］. Journal of Functional Foods，2017，30：179-193.
［6］Sun Y，Tsao R，Chen F，et al. The phenolic profiles of Radix Tetrastigma after solid phase extraction (SPE) and their antitumor effects and antioxidant activities in H22 tumor-bearing mice［J］. Food & Function，2017，8(11)：4014-4027.
［7］倪小兵，夏凌云，牛玉明，等. 三叶青提取物对口腔鳞状细胞癌生物学行为的体外研究［J］. 临床口腔医学杂志，2020，36(7)：395-398.
［8］洪森荣，黄丹丹，黄诗慧，等. 怀玉山三叶青2个栽培种块根的转录组分析［J］. 福建农业学报，2021，36(1)：24-35.
［9］王芙蓉，王娟，陈泽南，等. 基于分子对接技术的抗新型冠状病毒三叶青化合物虚拟筛选［J］. 生命的化学，2021，41(5)：1068-1081.
［10］李聪，田培洁，张宇，等. 烟草花叶病毒P54基因的原核表达与蛋白纯化［J］. 福建农业学报，2021，36(2)：209-214.
［11］Nishikiori M，Dohi K，Mori M，et al. Membrane-bound tomato mosaic virus replication proteins participate in RNA synthesis and are associated with host proteins in a pattern distinct from those that are not membrane bound［J］. Journal of Virology，2006，80(17)：8459-8468.
［12］Hagiwara Y，Komoda K，Yamanaka T，et al. Subcellular localization of host and viral proteins associated with tobamovirus RNA replication［J］. The EMBO Journal，2003，22(2)：344-353.
［13］Tsujimoto Y，Numaga T，Ohshima K，et al. Arabidopsis tobamovirus MULTIPLICATION (TOM) 2 locus encodes a transmembrane protein that interacts with TOM1［J］. The EMBO Journal，2003，22(2)：335-343.
［14］尹明华，胡嘉琦，胡明艳，等. 怀玉山三叶青TOM2B isoform X1基因克隆和功能分析［J］. 山东农业科学，2021，53(8)：1-10.
［15］曹有龙，唐琳，颜钫，等. 枸杞脱毒苗的诱导及光合特性的分析研究［J］. 四川大学学报(自然科学版)，2001，38(4)：550-553.
［16］肖关丽，王贵淇，郭华春. 甘薯脱毒苗驯化培养及大田光合效率研究［J］. 西南农业学报，2012，25(2)：416-419.
［17］牛西强，罗潇云，康凯程，等. 辣椒PEBP基因家族的全基因组鉴定、比较进化与组织表达分析［J］. 园艺学报，2021，48(5)：947-959.

相似文献/References:

[1]洪森荣,柯维忠,陶月琴,等.怀玉山三叶青2个栽培种试管苗对干旱胁迫的生理响应及相关基因的表达[J].江苏农业科学,2022,50(4):117.
　Hong Senrong,et al.Physiological response of test tube seedlings of two Tetrastigma hemsleyanum cultivars in Huaiyu Mountain to drought stress and expression of related genes[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2022,50(2):117.
[2]尹明华,陈佳雯,陈瑞,等.怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白3基因克隆和功能分析[J].江苏农业科学,2022,50(6):32.
　Yin Minghua,et al.Cloning and functional analysis of tobacco virus multiplication protein 3 gene of Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg in Huaiyushan[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2022,50(2):32.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2021-12-07
基金项目：国家自然科学基金(编号：31960079)；江西省科技厅重点研发计划一般项目(编号：20202BBG73010、20192BBGL70050)；江西省教育厅科学技术研究项目(编号：GJJ201704)；上饶市科技局重点研发计划一般项目(编号：2020C002)；上饶市科技局平台载体建设项目(编号：2020J001、2019I017)。
作者简介：夏瑾华(1977—)，女，湖北黄石人，硕士，讲师，主要从事植物生物技术研究。E-mail：273340257@qq.com。
更新日期/Last Update: 2023-01-20