|本期目录/Table of Contents|

[1]章丽娇,赵冬敏,韩凯凯,等.坦布苏病毒RNA复制子系统的构建与应用[J].江苏农业科学,2023,51(19):153-157.
　Zhang Lijiao,et al.Construction and application of Tembusu virus JXSP strain RNA replicon system[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2023,51(19):153-157.
点击复制

坦布苏病毒RNA复制子系统的构建与应用(PDF)
分享到：

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第51卷
期数:
2023年第19期
页码:
153-157
栏目:
畜牧兽医与水产蚕桑
出版日期:
2023-10-05

文章信息/Info

Title:
Construction and application of Tembusu virus JXSP strain RNA replicon system
作者:
章丽娇1; 2; 赵冬敏1; 2; 韩凯凯1; 2; 黄欣梅1; 2; 杨婧1; 2; 吴凤瑶1; 2; 刘青涛1; 2; 刘宇卓1; 2; 张小飞1; 2; 李银1; 2
1.江苏省农业科学院兽医研究所，江苏南京 210014； 2.兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心，江苏泰州 225300
Author(s):
Zhang Lijiao; et al
关键词:
坦布苏病毒; 复制子; RNA; 转录; 蛋白表达; 转染
Keywords:
-
分类号:
S852.65+7
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
黄病毒RNA复制子在病毒致病机制、新型疫苗和药物研发上应用广泛，而坦布苏病毒(Tembusu virus，TMUV)是我国新发现的以引起水禽产蛋量下降为主要特征的黄病毒属成员。为构建TMUV RNA复制子，本研究以TMUV JXSP株感染性克隆为基础，利用Overlap PCR分别对病毒基因组进行CPrME、CPrM、PrME和PrM等4种方式结构蛋白基因的缺失，并在缺失部位插入绿色荧光蛋白报告基因，报告基因下游连接口蹄疫病毒2A蛋白基因序列，获得的基因组全长PCR融合产物纯化后，体外转录成mRNA，并转染至BHK-21细胞，采用荧光显微镜观察不同时间点绿色荧光蛋白的表达；利用构建的TMUV RNA复制子，将绿色荧光蛋白基因替换为H9亚型禽流感病毒HA基因，mRNA转染细胞72 h后Western blotting检测蛋白表达。结果显示，4种TMUV RNA复制子转染细胞的胞浆和胞核内均能观察到明显的绿色荧光信号；Western blotting能检测到HA蛋白的表达。结果表明，本研究成功构建了ΔCPrME、ΔCPrM、ΔPrME和ΔPrM 等4种能有效表达外源基因的TMUV RNA复制子。
Abstract:
-

参考文献/References:

［1］曹贞贞，张存，黄瑜，等. 鸭出血性卵巢炎的初步研究［J］. 中国兽医杂志，2010，46(12)：3-6，97.
［2］Su J L，Li S，Hu X D，et al. Duck egg-drop syndrome caused by BYD virus，a new Tembusu-related flavivirus［J］. PLoS One，2011，6(3)：e18106.
［3］Cao Z Z，Zhang C，Liu Y H，et al. Tembusu virus in ducks，China［J］. Emerging Infectious Diseases，2011，17(10)：1873-1875.
［4］Kümmerer B M.Establishment and application of Flavivirus replicons［M］//Advances in experimental medicine and biology. Singapore：Springer Singapore，2018：165-173.
［5］Yun S I，Choi Y J，Yu X F，et al. Engineering the Japanese encephalitis virus RNA genome for the expression of foreign genes of various sizes：implications for packaging capacity and RNA replication efficiency［J］. Journal of NeuroVirology，2007，13(6)：522-535.
［6］Shi P Y，Tilgner M，Lo M K. Construction and characterization of subgenomic replicons of New York strain of West Nile virus［J］. Virology，2002，296(2)：219-233.
［7］Leardkamolkarn V，Sirigulpanit W，Chotiwan N，et al. Development of Dengue type-2 virus replicons expressing GFP reporter gene in study of viral RNA replication［J］. Virus Research，2012，163(2)：552-562.
［8］Xie X P，Zou J，Shan C，et al. Zika virus replicons for drug discovery［J］. EBioMedicine，2016，12：156-160.
［9］Zhang L J，Sun M X，Zhang Q S，et al. Long-term passage of duck Tembusu virus in BHK-21 cells generates a completely attenuated and immunogenic population with increased genetic diversity［J］. Vaccine，2020，38(4)：933-941.
［10］ de Felipe P，Luke G A，Hughes L E，et al. Eunum pluribus：multiple proteins from a self-processing polyprotein［J］. Trends in Biotechnology，2006，24(2)：68-75.
［11］杨玉姣，熊柯尧，陶家成，等. 黄病毒基因组非编码区的结构与功能研究进展［J］. 病毒学报，2021，37(2)：435-444.
［12］Kowalski P S，Rudra A，Miao L，et al. Delivering the messenger：advances in technologies for therapeutic mRNA delivery［J］. Molecular Therapy，2019，27(4)：710-728.

相似文献/References:

[1]张敬峰,李银,赵冬敏,等.鸭源坦布苏病毒株NJX-4的分离鉴定及部分生物学特性[J].江苏农业科学,2013,41(11):228.
　Zhang Jingfeng,et al.Isolation，identification and partial biological characteristics of duck-derived Tembusu virus strain NJX-4[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(19):228.
[2]韩凯凯,李银,黄欣梅,等.鹅新型坦布苏病毒囊膜蛋白的二级结构与B细胞表位预测[J].江苏农业科学,2014,42(06):166.
　Han Kaikai,et al.Prediction of secondary structure and B cell epitope of envelope protein of goose Tembusu virus[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(19):166.
[3]章丽娇,李银,刘清涛,等.坦布苏病毒感染DF-1细胞入侵途径的初步研究[J].江苏农业科学,2021,49(15):155.
　Zhang Lijiao,et al.Preliminary study on invasion pathways of Tembusu virus in DF-1 cells[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2021,49(19):155.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2023-04-07
基金项目：江苏省农业科技自主创新资金［编号：CX(21)3134］；国家自然科学基金(编号：31802200)。
作者简介：章丽娇(1987—)，女，浙江德清人，博士，副研究员，主要从事家禽病毒分子生物学研究。E-mail：zhang62810003@126.com。
更新日期/Last Update: 2023-10-05