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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第51卷

期数:

2023年第23期

页码:

17-21

栏目:

生物技术

出版日期:

2023-12-05

文章信息/Info

Title:

Editing efficiency and drug resistance of streptomycin resistant gene rpsL of Escherichia coli by CA-NHEJ system

作者:

谢钰珍¹; 覃鸿妮¹; 吴凡¹; 胡杨晓然²; 薛高旭³; 赵雪³; 张勇¹

1.苏州工业园区服务外包职业学院，江苏苏州 215123； 2.苏州工业园区德威联合书院，江苏苏州 215123；3.金唯智生物科技有限公司，江苏苏州 215123

Author(s):

Xie Yuzhen; et al

关键词:

CA-NHEJ系统; CA-HR系统; rpsL基因; 耐药性

Keywords:

-

分类号:

S188

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

以控制质粒拷贝数的pcnB基因与链霉素耐药性rpsL基因为靶标基因，研究CA-NHEJ系统对大肠杆菌的基因编辑效率，及rpsL相关基因与链霉素耐药性的关系。通过CA-NHEJ系统成功实现了对大肠杆菌MG1655的pcnB和rpsL基因编辑，其中，pcnB基因编辑效率达100%，rpsL基因仅有1个克隆缺失第22~24位3个氨基酸，其他4个克隆未编辑成功但具有链霉素抗性；进一步利用CA-HR系统敲除大肠杆菌MG1655的rpsL基因CCTGCGCTG序列(第22~24位氨基酸)，编辑效率达100%，验证了CA-HR的高效性，抗性鉴定表明，该序列是影响链霉素抗性的关键序列，是一个未曾报道的新突变；对于未编辑成功但具有链霉素抗性的4个克隆进行基因测序及比对，找出了rhsC和gadB等6个可能与链霉素抗性相关的其他基因。

Abstract:

-

参考文献/References:

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相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2022-07-21
基金项目：国家自然科学基金面上项目(编号：22077092)；江苏省精准诊疗药物创制工程研究中心（苏州大学）开放课题（编号：SDGC2239）；2022年江苏省高校“青蓝工程”资助项目。
作者简介：谢钰珍(1988—)，女，江苏连云港人，硕士，讲师，研究方向为分子生物学。E-mail：xieyz@siso.edu.cn。
通信作者：覃鸿妮，博士，讲师，研究方向为分子生物学。E-mail：qinhn@siso.edu.cn。

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更新日期/Last Update: 2023-12-05