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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第47卷

期数:

2019年第09期

页码:

204-207

栏目:

畜牧兽医与水产蚕桑

出版日期:

2019-05-27

文章信息/Info

Title:

Establishment of a multiplex reverse transcriptase PCR detection method of avian influenza H5，H7 and H9 virus

作者:

赵冬敏;  吴青;  赵翰飞;  刘青涛;  杨婧;  黄欣梅;  刘宇卓;  韩凯凯;  毕可然;  李银

江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏南京 210014

Author(s):

Zhao Dongmin; et al

关键词:

禽流感病毒; H5亚型; H7亚型; H9亚型; 三重RT-PCR

Keywords:

-

分类号:

S852.65⁺7

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

根据GenBank中H5、H7、H9亚型禽流感病毒血凝素蛋白(HA)编码基因，使用DNAStar软件比较分析筛选出特异的保守片段，设计3对引物H5-P1/H5-P2、H7-P3/P4和H9-P5/P6。在此基础上，建立了H5、H7、H9亚型禽流感的三重RT-PCR检测方法，本方法可同时检测出样品中的H5、H7、H9亚型禽流感病毒。敏感性试验结果表明，该方法检测H5、H7、H9亚型禽流感RNA的敏感性分别达2.80、10.50、5.73 pg/μL，该方法检测其他相关病毒时均为阴性，具有很高的特异性，此外，该方法具有良好的重复性。利用所建立方法对240份禽流感临床样品进行检测，结果与血凝试验和血凝抑制试验结果的符合率为100%。此诊断方法检出时间早，且特异、敏感、经济、快速，可普遍推广，在禽流感诊断和防制中具有重要意义和应用价值。

Abstract:

-

参考文献/References:

［1］刘燕，钱爱东. 禽流感病毒H5、H9亚型的多重RT-PCR鉴别诊断［J］. 中国预防兽医学报，2005，27(1)：74-76.
［2］Guan Y，Vijaykrishna D，Bahl J，et al. The emergence of pandemic influenza viruses［J］. Protein & Cell，2010，1(1)：9-13.
［3］Subbarao K，Katz J. Avian influenza viruses infecting humans［J］. Cellular and Molecular Life Sciences，2000，57(12)：1770-1784.
［4］Claas E C，de Jong J C，van Beek R，et al. Human influenza virus A/HongKong/156/97(H5N1)infection［J］. Vaccine，1998，16(9/10)：977-978.
［5］Taubenberger J K，Morens D M. Influenza viruses：breaking all the rules［J］. mBio，2013，4(4)：e00313-e00365.
［6］陈伯伦，张泽纪，陈伟斌. 禽流感研究：Ⅰ 鸡A型流感病毒分离与血清学初步鉴定［J］. 中国兽医杂志，1994，22(10)：3-5.
［7］刘琳玉，姜双应，汪立杰，等. 青海湖地区5株H9N2亚型禽流感病毒全基因组序列进化分析［J］. 病毒学报，2014，30(2)：109-118.
［8］吴海燕，李明义，范根成，等. 33株H9N2亚型禽流感病毒分离株分子流行特点的研究［J］. 中国动物检疫，2010，27(6)：31-33.
［9］Parvin R，Heenemann K，Halami M Y，et al. Full-genome analysis of avian influenza virus H9N2 from Bangladesh reveals internal gene reassortments with two distinct highly pathogenic avian influenza viruses［J］. Archives of Virology，2014，159(7)：1651-1661.
［10］Peiris M，Yuen K Y，Leung C W，et al. Human infection with influenza H9N2［J］. Lancet，1999，354(9182)：916-917.
［11］傅生芳，独军政，常惠芸，等. 禽流感病毒的分子生物学研究进展［J］. 动物医学进展，2005，26(5)：22-24.
［12］邓振旭. 禽流感病毒检测技术的研究进展［J］. 安徽农业科学，2006，34(12)：2740-2741.
［13］张应国，Song Jian Ling，Hu Yuan Yuan，et al. 禽流感病毒 RT-PCR 及多重RT-PCR检测技术的建立［J］. 中国兽医科技，2005，35(8)：600-604.
［14］Zhang W H，Guo H，Wang W L，et al. Designing Primers foe H5 and H7 subtypes of avian influenza virus and multiplex RT-PCR amplification［J］. Agricultural Science & Technology，2008，39(1)：15-17.
［15］陈思怀，乔宪凤，华文君，等. 多重RT-PCR快速检测禽流感病毒的研究［J］. 湖北农业科学，2006，45(1)：20-23.
［16］马鸣潇，金宁一，王振国，等. 检测禽流感病毒RT-PCR一步法的建立及H5、H9亚型的鉴定［J］. 中国生物制品学杂志，2005，18(5)：63-65.

相似文献/References:

[1]司振书,贾国富.H9亚型禽流感病毒的分子生物学鉴定[J].江苏农业科学,2016,44(06):64.
　Si Zhenshu,et al.Molecular identification of H9 subtype avian influenza virus[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2016,44(09):64.
[2]武军元,黄忠武,康强,等.新疆油鸡禽流感病毒Xj14分离株PA基因的克隆与序列分析[J].江苏农业科学,2017,45(08):20.
　Wu Junyuan,et al.Cloning and sequence analysis of PA gene of avian influenza virus Xj14 isolate from Xinjiang oil chicken[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2017,45(09):20.
[3]司振书,殷国政,路建彪,等.H9N2亚型AIV双重RT-PCR检测方法的建立[J].江苏农业科学,2019,47(07):35.
　Si Zhenshu,et al.Establishment of a double RT-PCR detection method for H9N2 subtype avian influenza virus[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2019,47(09):35.
[4]马平,杨婧,刘宇卓,等.H9N2亚型禽流感病毒NS1蛋白原核表达载体的构建及表达[J].江苏农业科学,2022,50(1):40.
　Ma Ping,et al.Construction and expression of prokaryotic expression vector of H9N2 subtype avian influenza virus NS1 protein[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2022,50(09):40.

备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2018-01-19
基金项目：国家重点研发计划(编号：2017YFD0500800)；江苏省农业科技自主创新资金［编号：CX(15)1058］。
作者简介：赵冬敏(1982—)，女，山东兖州人，博士，副研究员，主要从事家禽重大疫病流行病学和致病分子机制的研究。Tel：(025)84390047；E-mail：zhaodongmin126@126.com。
通信作者：李银，博士，研究员，主要从事家禽疫病流行病学和防制研究。Tel：(025)84391687；E-ma

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更新日期/Last Update: 2019-05-05