[1]朱家平,肖琦,钱雯娴,等.猪圆环病毒2型和3型双重PCR方法的建立及在藏猪猪圆环病毒检测中的应用[J].江苏农业科学,2022,50(3):172-177.
　Zhu Jiaping,et al.Establishment of double PCR assay for porcine circovirus type 2 and type 3 and its application in detection of porcine circovirus in Tibetan pigs[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2022,50(3):172-177.
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猪圆环病毒2型和3型双重PCR方法的建立及在藏猪猪圆环病毒检测中的应用()

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第50卷
期数:
2022年第3期
页码:
172-177
栏目:
畜牧兽医与水产蚕桑
出版日期:
2022-02-05

文章信息/Info

Title:
Establishment of double PCR assay for porcine circovirus type 2 and type 3 and its application in detection of porcine circovirus in Tibetan pigs
作者:
朱家平1; 2;  肖琦2;  钱雯娴1; 2;  赵霞玲1; 2;  张冯禧1; 2;  尹力鸿1; 2;  温立斌2;  索朗斯珠1;  何孔旺2
1.西藏农牧学院动物科学学院，西藏林芝 860000；
2.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室，江苏南京 210014
Author(s):
Zhu Jiaping; et al
关键词:
猪圆环病毒2型; 猪圆环病毒3型; 双重PCR方法; 藏猪; 临床应用
Keywords:
-
分类号:
S858.28
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
为同时并快速检测和鉴别猪圆环病毒2型(PCV-2)与猪圆环病毒3型(PCV-3)，并调查西藏林芝地区猪圆环病毒的感染情况，根据笔者所在实验室PCV-2和PCV-3单重PCR方法，建立检测PCV-2和PCV-2双重PCR的方法，构建标准质粒并经优化反应条件和反应体系后进行特异性和灵敏性的测定，并对西藏林芝周边地区藏猪粪便进行检测。结果显示，建立的PCV-2和PCV-3双重PCR检测方法对PCV1、CSFV、PRRSV、PRV、PPV、PEDV等常见猪源病原的检测结果均为阴性；并且建立的PCV-2和PCV-3双重PCR的灵敏度与PCV-2和PCV-3单一PCR的灵敏度一致，均能达到101拷贝数/μL；利用建立好的双重PCR方法对西藏藏猪临床样品进行检测，PCV-2、PCV-3的阳性率分别为38.3%(18/47)、12.8%(6/47)，混合感染率为10.6%(5/47)，与单一PCR的符合度为100%。由此可见，本研究建立的PCR方法方便、特异、准确，并有很高的敏感度，适于临床样品的检测，为PCV-2与PCV-3的诊断和防控提供理论依据。
Abstract:
-

参考文献/References:

［1］Mankertz A，aliskan R，Hattermann K，et al. Molecular biology of Porcine Circovirus：Analyses of gene expression and viral replication［J］. Veterinary Microbiology，2004，98(2)：81-88.
［2］Tischer I，Rasch R，Tochtermann G.Characterization of papovavirus-and picornavirus-like particles in permanent pig kidney cell lines［J］. Medizinische Mikrobiologie und Parasitologie，1974，226(2)：153-167.
［3］Ellis J，Hassard L，Clark E，et al. Isolation of Circovirus from lesions of pigs with postweaning multisystemic wasting syndrome［J］. The Canadian Veterinary Journal，1998，39(1)：44-51.
［4］谷思颖，屈勇刚，魏其，等. 猪圆环病毒3型新疆株Cap蛋白的原核表达及纯化［J］. 中国畜牧兽医，2020，47(8)：2660-2665.
［5］Zhang H H，Hu W Q，Li J Y，et al. Novel Circovirus species identified in farmed pigs designated as Porcine Circovirus 4，Hunan Province，China［J］. Transboundary and Emerging Diseases，2020，67(3)：1057-1061.
［6］郭佳慧，肖琦，汪伟，等. 两株猪圆环病毒2型的分离鉴定和小鼠致病性试验［J］. 畜牧与兽医，2019，51(11)：102-108.
［7］郭影成，付守鹏，高学勇，等. 吉林省猪圆环病毒3型的分子流行病学调查及遗传演化分析［J］. 中国畜牧兽医，2019，46(5)：1483-1490.
［8］郎洪武，张广川，吴发权，等. 断奶猪多系统衰弱综合征血清抗体检测［J］. 中国兽医科技，2000，30(3)：3-5.
［9］Ku X，Chen F，Li P，et al. Identification and genetic characterization of porcine Circovirus type 3 in China［J］. Transboundary and Emerging Diseases，2017，64(3)：703-708.
［10］肖琦，茅爱华，汪伟，等. 猪圆环病毒3型PCR检测方法的建立及其应用［J］. 中国动物传染病学报，2018，26(2)：9-14.
［11］王小敏，曹东阳，徐祥兰，等. 2010—2015年华东地区猪圆环病毒2型的分子流行病学分析［J］. 微生物学报，2020，60(4)：703-714.
［12］李倩文，杨榛，杨雅楠，等. 冬夏两季环境温度对藏猪生理特征及相关基因表达的影响［J］. 中国畜牧兽医，2021，48(3)：873-881.
［13］Zheng S，Wu X，Zhang L，et al. The occurrence of porcine Circovirus 3 without clinical infection signs in Shandong Province［J］. Transboundary and Emerging Diseases，2017，64(5)：1337-1341.
［14］Zhang J X，Liu Z G，Zou Y W，et al. First molecular detection of porcine Circovirus type 3 in dogs in China［J］. Virus Genes，2018，54(1)：140-144.
［15］Ou-Yang T，Niu G Y，Liu X H，et al. Recent progress on porcine Circovirus type 3［J］. Infection，Genetics and Evolution，2019，73：227-233.
［16］Woz＇niak A，Miek D，Bska P，et al. Does porcine Circovirus type 3 (PCV3) interfere with porcine Circovirus type 2 (PCV2) vaccine efficacy？［J］. Transboundary and Emerging Diseases，2019，66(4)：1454-1461.
［17］董亚青，郭广富，朱爱萍，等. 猪圆环病毒2型PCR检测方法的建立及应用［J］. 黑龙江畜牧兽医，2016(22)：126-128.
［18］Chamberlain J S，Gibbs R A，Ranier J E，et al. Deletion screening of the Duchenne muscular dystrophy locus via multiplex DNA amplification［J］. Nucleic Acids Research，1988，16(23)：11141-11156.
［19］季程远，王蔚怡，黄欣，等. 猪圆环病毒2型和3型双重PCR检测方法的建立与应用［J］. 中国预防兽医学报，2018，40(10)：913-916.
［20］温海京，石玉佩，胡胜云，等. 猪圆环病毒2型与3型双重PCR检测方法的建立［J］. 北京农学院学报，2020，35(3)：101-105.
［21］杨永宁，任宜家，申禄昌. 猪圆环病毒2型和3型双重PCR鉴别检测方法的建立及应用［J］. 畜牧与兽医，2018，50(12)：91-95.
［22］钟顺平，刘应华，杨贵伟，等. 云南省勐腊县猪场PCV2和PCV3的感染状况［J］. 贵州农业科学，2020，48(5)：89-91.
［23］曹启明. 江苏部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学调查及其致病性研究［D］. 扬州：扬州大学，2017.
［24］苗丽娟，刘东旭，尹柏双. 2016—2018年吉林省猪圆环病毒2型流行病学调查及序列分析［J］. 中国兽医杂志，2020，56(3)：33-36，40.
［25］张家瑞，阿丽亚·买买提依明，屈勇刚，等. 新疆部分地区猪圆环病毒2型抗体检测与分析［J］. 中国猪业，2020，15(4)：43-46.
［26］张毅，陈斌，邵靓，等. 2017年四川省猪群5种病毒性传染病流行病学调查［J］. 畜牧与兽医，2018，50(9)：82-86.
［27］徐朋丽，赵宇，张宇，等. 猪圆环病毒2型和3型双重PCR检测方法的建立［J］. 中国兽医学报，2019，39(1)：25-30.
［28］任敏，屈勇刚，魏其，等. 新疆首次检测到猪圆环病毒3型及其全基因组进化分析［J］. 黑龙江畜牧兽医，2019(21)：76-80，86.

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[1]郭广富,曹军平,吴艳涛,等.江苏泰州地区猪圆环病毒2型感染情况调查[J].江苏农业科学,2013,41(10):188.
　Guo Guangfu,et al.Investigation of porcine circovirus type 2 infection in Taizhou，Jiangsu Province[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(3):188.
[2]郭广富,曹军平,朱爱萍,等.猪圆环病毒2型泰州株的分离鉴定[J].江苏农业科学,2016,44(04):294.
　Guo Guangfu,et al.Isolation and identification of Porcine circovirus type 2 Taizhou strain[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2016,44(3):294.
[3]王涛,王海燕,徐向明,等.2009—2011年某猪场PCV2血清学监测及分析[J].江苏农业科学,2014,42(07):229.
　Wang Tao,et al.Serological monitoring and analysis of porcine circovirus type 2 infection in a swine farm from 2009 to 2011[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(3):229.
[4]汪伟,胡屹屹,何孔旺,等.猪圆环病毒2型体外刺激猪髋动脉血管内皮细胞的炎症相关细胞因子mRNA转录分析[J].江苏农业科学,2017,45(21):32.
　Wang Wei,et al.Inflammation-associated cytokines mRNA transcriptional profiles of pig iliac endothelial cells stimulated by porcine circovirus type 2 in vitro[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2017,45(3):32.
[5]汪伟,何孔旺,温立斌,等.人参皂苷Rb1对猪圆环病毒2型疫苗免疫的增强效果[J].江苏农业科学,2018,46(21):180.
　Wang Wei,et al.Immunological enhancement effect of ginsenoside Rb1 in porcine circovirus virus type 2 vaccine[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2018,46(3):180.
[6]卓严玲,颜秋,邓启霞,等.猪热休克蛋白40(Hsp40)基因的克隆及过表达和RNA干扰载体的构建[J].江苏农业科学,2019,47(17):63.
　Zhuo Yanling,et al.Cloning and overexpression of porcine heat shock protein 40 (Hsp40) gene and construction of RNA interference vector[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2019,47(3):63.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2021-09-26
基金项目：西藏农牧学院研究生创新计划(编号：YJS2020-17)；国家长期性基础性数据监测专项［编号：ZX(21)5008］。
作者简介：朱家平(1994- )，男，河南周口人，硕士研究生，主要从事高原动物传染病防控研究。E-mail：zhujp0206@yeah.net。
通信作者：索朗斯珠，博士，教授，主要从事高原动物传染病疫病防控研究，E-mail：xzslsz@163.com；何孔旺，博士，研究员，主要从事动物疫病防治，E-mail：kwh2003@263.net。
更新日期/Last Update: 2022-02-05