|本期目录/Table of Contents|

[1]王雷,崔震海,张立军.玉米C4型PEPC全长基因的克隆与表达载体构建[J].江苏农业科学,2014,42(11):26-29.
　Wang Lei,et al().Cloning and expression vector construction of full-length C4 type PEPC gene in maize[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(11):26-29.
点击复制

玉米C4型PEPC全长基因的克隆与表达载体构建(PDF)
分享到：

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第42卷
期数:
2014年11期
页码:
26-29
栏目:
生物技术
出版日期:
2014-11-25

文章信息/Info

Title:
Cloning and expression vector construction of full-length C4 type PEPC gene in maize
作者:
王雷;  崔震海;  张立军
沈阳农业大学生物科学技术学院/辽宁省植物基因工程技术研究中心，辽宁沈阳 110866
Author(s):
Wang Lei; et al(26)
关键词:
玉米; PEPC; 基因克隆; 序列分析; 表达载体构建
Keywords:
-
分类号:
Q786；S513.01
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
以玉米自交系郑58基因组DNA为模板，设计了2对特异性引物，分别PCR扩增玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)启动子及其全长编码序列，利用In-Fusion技术将两者定向克隆到载体pCAMBIA-1391Z上，并对重组子进行测序验证。结果表明，该PEPC启动子序列与GenBank中的玉米自交系B73的同源性为97.70%，片段长1 200 bp；全长编码序列同源性为97.90%，片段长6 330 bp。通过Hind Ⅲ和EcoRⅠ酶切载体pCAMBIA-1391Z，利用In-Fusion技术将线性载体与之前获得的2个PCR片段连接，测序结果与预期序列一致，表明成功构建了 pCAMBIA-1391Z-PEPC 植物表达载体。对克隆和载体构建中存在的问题进行了讨论，以期为该类型基因的高效克隆及表达载体的构建提供参考、为C4型 PEPC基因功能研究和C3植物遗传转化提供可用的基因序列。
Abstract:
-

参考文献/References:

［1］龚春梅，宁蓬勃，王根轩，等. C3和C4植物光合途径的适应性变化和进化［J］. 植物生态学报，2009，33(1)：206-221. ［2］崔国瑞，张立军，朱延姝，等. 植物C4光合途径的形成及其影响因素［J］. 植物生理学通讯，2009(7)：711-720.
［3］Von Caemmerer S，Furbank R T. The C4 pathway：an efficient CO2 pump［J］. Photosynthesis Research，2003，77(2/3)：191-207.
［4］李卫华，郝乃斌，戈巧英，等. C3植物中C4途径的研究进展［J］. 植物学通报，1999，16(2)：2-11.
［5］Matsuoka M，Furbank R T，Fukayama H，et al. Molecular engineering of C4 photosynthesis［J］. Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecular Biology，2001，52(1)：297-314.
［6］Engelmann S，Blsing O E，Gowik U，et al. Molecular evolution of C4 phosphoenolpyruvate carboxylase in the genus Flaveria—a gradual increase from C3 to C4 characteristics［J］. Planta，2003，217(5)：717-725.
［7］Blsing O E，Ernst K，Streubel M，et al. The non-photosynthetic phosphoenolpyruvate carboxylases of the C4 dicot Flaveria trinervia—implications for the evolution of C4 photosynthesis［J］. Planta，2002，215(3)：448-456.
［8］Osborne C P，Sack L. Evolution of C4 plants：a new hypothesis for an interaction of CO2 and water relations mediated by plant hydraulics［J］. Philosophical Transactions of the Royal Society of London. Series B，Biological Sciences，2012，367(1588)：583-600.
［9］陈绪清，张晓东，梁荣奇，等. 玉米C4型pepc基因的分子克隆及其在小麦的转基因研究［J］. 科学通报，2004，49(19)：1976-1982.
［10］Hudspeth R L，Grula J W，Dai Z，et al. Expression of maize phosphoenolpyruvate carboxylase in transgenic tobacco［J］. Plant Physiology，1992，98(2)：458-464.
［11］Husler R E，Hirsch H J，Kreuzaler F，et al. Overexpression of C4-cycle enzymes in transgenic C3 plants：a biotechnological approach to improve C3-photosynthesis［J］. Journal of Experimental Botany，2002，53(369)：591-607.
［12］Agarie S，Miura A，Sumikura R，et al. Overexpression of C4 PEPC caused O2-insensitive photosynthesis in transgenic rice plants［J］. Plant Science，2002，162(2)：257-265.
［13］Merkelbach S，Gehlen J，Denecke M，et al. Cloning，sequence analysis and expression of a cDNA encoding active phosphoenolpyruvate carboxylase of the C3 plant Solanum tuberosum［J］. Plant Molecular Biology，1993，23(4)：881-888.
［14］Fukayama H, Tsuchida H, Agarie S, et al. Significant accumulation of C4-specific pyruvate, orthophosphate dikinase in a C3 plant，rice［J］. Plant Physiology, 2001, 127(3): 1136-1146.
［15］Fukayama H，Tamai T，Taniguchi Y，et al. Characterization and functional analysis of phosphoenolpyruvate carboxylase kinase genes in rice［J］. The Plant Journal：for Cell and Molecular Biology，2006，47(2)：258-268.
［16］Brown R H，Bassett C L，Cameron R G，et al. Photosynthesis of F1 hybrids between C4 and C3-C4species of flaveria［J］. Plant Physiology，1986，82(1)：211-217.
［17］Agarie S, Kai M, Takatsuji H, et al. Expression of C3 and C4 photosynthetic characteristics in the amphibious plant Eleocharis vivipara：structure and analysis of the expression of isogenes for pyruvate, orthophosphate dikinase［J］. Plant Molecular Biology, 1997, 34(2):363-369.
［18］Sleight S C, Sauro H M. BioBrickTM：assembly using the in-fusion PCR cloning kit［J］. Methods in Molecular Biology, 2013, 1073: 19-30.
［19］韩凯，翁建峰，郝转芳，等. 一种快速高效构建植物表达载体的方法［J］. 玉米科学，2012，20(1)：61-66.
［20］林春晶，韦正乙，蔡勤安，等. 几种植物转基因表达载体的构建方法［J］. 生物技术，2008，18(5)：84-87.

相似文献/References:

[1]孙建伟.水涝胁迫对玉米细胞保护酶同工酶的影响[J].江苏农业科学,2013,41(04):85.
[2]刘荣,张卫建,齐华,等.密植型玉米“中单909”高产群体结构特征[J].江苏农业科学,2013,41(05):56.
　Liu Rong,et al.Study on high yield population structure of close planting maize cultivar “Zhongdan 909”[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(11):56.
[3]沈浜凯,肖龙云,冯乃杰,等.黄腐酸和AM真菌对玉米幼苗抗旱性的影响[J].江苏农业科学,2013,41(05):64.
　Shen Bangkai,et al.Effects of fulvic acid and AM fungi on drought resistance of maize seedlings[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(11):64.
[4]张金然,缑艳霞,孙丽鹏.固氮螺菌157对玉米、向日葵的促生长作用[J].江苏农业科学,2014,42(12):116.
　Zhang Jinran,et al.Effects of Azospirillum 157 on growth of maize and sunflower[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(11):116.
[5]白小军,吴燕,牛艳,等.玉米中乙草胺和莠去津残留量GC-MS/MS分析法的建立[J].江苏农业科学,2014,42(11):334.
　Bai Xiaojun,et al().Establishment of GC-MS/MS analysis method of acetochlor and atrazine residues in maize[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(11):334.
[6]邹晓威,王娜,刘芬,等.玉米抗病相关基因在玉米与玉米丝黑穗病菌、玉米黑粉病菌互作过程中的表达差异分析[J].江苏农业科学,2014,42(11):150.
　Zou Xiaowei,et al(0).Different expression of resistance-related genes between Sporisorium reilianum and Ustilago maydis interact with corn[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(11):150.
[7]杨洪兴,陈静,陈艳萍.江苏省玉米机械化生产的发展及育种对策思考[J].江苏农业科学,2014,42(11):116.
　Yang Hongxing,et al().Development and breeding strategy of mechanized production of maize in Jiangsu Province[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(11):116.
[8]张丽妍,霍剑锋,孟繁盛,等.不同肥料、施肥水平及施用方法对玉米产量、性状及效益的影响[J].江苏农业科学,2014,42(11):119.
　Zhang Liyan,et al (9).Effects of different fertilizers，fertilizer levels and fertilizing methods on yield，characters and benefit of maize[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(11):119.
[9]雷恩,赵光明,刘艳红.不同稀释浓度松土保水剂对玉米营养生长的影响[J].江苏农业科学,2013,41(06):77.
　Lei En,et al.Effect of different dilutions of super absorbent polymer on vegetative growth of maize[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(11):77.
[10]黄文彻,赵艳花,杨世佳,等.山区杂交玉米起垄免中耕种植技术[J].江苏农业科学,2015,43(12):122.
　Huang Wenche,et al.Ridging and free mid-cultivation technology of hybrid corn in mountain area[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2015,43(11):122.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2014-01-12
基金项目：国家自然科学基金(编号：31000673)；教育部博士点基金(编号：20102103110001、20102103120001)；辽宁省科技厅科技攻关项目(编号：201201238)。
作者简介：王雷(1987—)，男，山东菏泽人，硕士研究生，研究方向为植物基因工程与分子生物学。E-mail：wanglei6399@126.com。
通信作者：张立军，博士，教授，主要从事植物发育与作物生物技术研究。Tel：(024) 88187613；E-mail：lijunzhang8@yahoo.com.cn。
更新日期/Last Update: 2014-11-25