«上一篇/Previous Article|本期目录/Table of Contents|下一篇/Next Article»

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第43卷

期数:

2015年01期

页码:

40-43

栏目:

生物技术

出版日期:

2015-01-25

文章信息/Info

Title:

Purification and enzymology properties of Trichoderma koningii endo-β-glucanase

作者:

覃益民;  张静茹;  叶锦 ;  甘冠萍;  覃振央

广西大学化学化工学院，广西南宁 530004

Author(s):

Qin Yimin; et al

关键词:

康氏木霉; 内切β-葡聚糖苷酶; 分离纯化; 酶学性质

Keywords:

-

分类号:

Q556⁺.2

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

康氏木霉GIMP3.444经摇瓶发酵，获得分泌到胞外的纤维素酶，粗酶液经(NH₄)₂SO₄分级沉淀、Sephacryl S200凝胶过滤层析、DEAE Sepharose FF离子交换层析及Octrl Separose CL-4B疏水层析分离纯化出一种内切型的β-葡聚糖苷酶，SDS-PAGE电泳鉴定为单一条带，BIO-RAD分析相对分子量为61.8 ku。 该内切β-葡聚糖苷酶的最适反应温度为55 ℃，最适反应pH值为4.4，作用于羧甲基纤维素钠时，Lineweaver-Burk法求得K_m、V_max分别为4.81 mg/mL、2.48 mg/(min·mL)。

Abstract:

-

参考文献/References:

［1］Menon V，Rao M L. Trends in bioconversion of lignocellulose： Biofuels，platform chemicals and biorefinery concept［J］. Progress in Energy and Combustion Science，2012，38(4)： 522-550.
［2］Van Dyk J S，Pletschke B I. A review of lignocellulose bioconversion using enzymatic hydrolysis and synergistic cooperation between enzymes-factors affecting enzymes，conversion and synergy［J］. Biotechnology Advances，2012，30(6)： 1458-1480.
［3］卢迪，陈洪章，马润宇. 秸秆质外体蛋白对纤维素酶活力的影响［J］. 生物工程学报，2006，22(2)：257-262.
［4］Kim E S，Lee H J，Bang W G，et al. Functional characterization of a bacterial expansin from Bacillus subtilis for enhanced enzymatic hydrolysis of cellulose［J］. Biotechnology and Bioengineering，2009，102(5)： 1342-1353.
［5］Han Ye Jun，Chen Hong Zhang. Synergism between hydrophobic proteins of corn stover and cellulase in lignocellulose hydrolysis［J］. Biochemical Engineering Journal，2010，48(2)： 218-224.
［6］覃益民，高进，刘幽燕，等. 一种来源于康氏木霉的纤维素酶增效蛋白的分离纯化［J］. 化工学报，2011，62(10)：2893-2897.
［7］Bradford M M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding［J］. Analytical Biochemistry，1976，72(1/2)： 248-254.
［8］Miller G L. Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing sugar［J］. Analytical Biochemistry，1959，31(3)： 426-428.
［9］汪家政，范明. 蛋白质技术手册［M］. 北京：科学出版社，2000：77-100.
［10］Shyamala S，Ravikumar S，Vikramathithan J，et al. Isolation，purification，and characterization of two thermostable endo-1，4-β-D-glucanase forms from Opuntia vulgaris［J］. Applied Biochemistry and Biotechnology，2011，165(7/8)： 1597-1610.
［11］Wood T M，Mccrae S I. The cellulase of Trichoderma koningii. Purification and properties of some endoglucanase components with special reference to their action on cellulose when acting alone and in synergism with the cellobiohydrolase［J］. Biochemical Journal，1978，171(1)： 61-72.
［12］Fujii M，Mori J I，Homma T，et al. Synergy between an endoglucanase and cellobiohydrolases from Trichoderma koningii［J］. The Chemical Engineering Journal，1995，59(3)： 315-319.
［13］那安，马建华，崔福绵，等. 康氏木霉纤维素酶系中C_x酶多分子型的分离纯化及某些性质［J］. 真菌学报，1983，2(1)：50-58，66.
［14］黄艳，凌敏，覃拥灵，等. 康氏木霉内切葡聚糖酶(EGⅠ)基因的克隆及表达［J］. 生物技术，2008，18(2)：10-13.
［15］Samanta S，Basu A，Halder U C，et al. Characterization of trichoderma reesei endoglucanase Ⅱ expressed heterologously in pichia pastoris for better biofinishing and biostoning［J］. Journal of Microbiology，2012，50(3)： 518-525.
［16］朱年青，夏文静，勇强. 里氏木霉纤维素酶的分离纯化及酶学性质［J］. 生物加工过程，2010，8(3)：40-43.
［17］杨树林，孟广荣，李校堃，等. 绿色木霉MJ1产内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及酶学性质［J］. 微生物学通报，2006，33(5)：75-79.
［18］阎伯旭，高培基. 内切葡聚糖苷水解酶的分离纯化和内源荧光性质［J］. 生物化学杂志，1997，13(5)：89-94.

相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2014-03-27
项目基金：国家自然科学基金(编号：21276053)；广西壮族自治区生物炼制重点实验室培育基地开放课题(编号：GXBF11-04)。
作者简介：覃益民(1962—)，男，广西贵港人，博士，副教授，主要从事生物加工与分离方面的研究。Tel：(0771)3233718；E-mail： qym6289@sina.com。

常用功能

更新日期/Last Update: 2015-01-25