|本期目录/Table of Contents|

[1]张娜,李群,高兴旺,等.葡萄ISSR-PCR反应体系的建立与正交设计优化[J].江苏农业科学,2016,44(09):47-50.
　Zhang Na,et al.Establishment of ISSR-PCR reaction system and its optimization using orthogonal design for grape[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2016,44(09):47-50.
点击复制

葡萄ISSR-PCR反应体系的建立与正交设计优化(PDF)
分享到：

《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第44卷
期数:
2016年09期
页码:
47-50
栏目:
生物技术
出版日期:
2016-09-25

文章信息/Info

Title:
Establishment of ISSR-PCR reaction system and its optimization using orthogonal design for grape
作者:
张娜;  李群;  高兴旺;  赖晓辉;  李佳;  丁金鹏
新疆大学生命科学与技术学院，新疆乌鲁木齐 830046
Author(s):
Zhang Na; et al
关键词:
葡萄; ISSR-PCR; 反应体系; 单因素试验; 正交设计; 优化
Keywords:
-
分类号:
S663.103
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
建立和优化稳定的葡萄ISSR-PCR反应体系，为进一步开展葡萄遗传多样性研究和品种选优提供理论依据。运用改良的CTAB法从葡萄嫩叶中提取基因组总DNA，通过单因素试验分析dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度、DNA模板用量、Taq DNA聚合酶用量等5个因素对葡萄ISSR-PCR反应体系扩增结果的影响，并采用正交设计试验方法优化建立葡萄ISSR-PCR最佳反应体系。优化的最佳ISSR-PCR反应体系(20 μL)为：10×PCR buffer、0.225 mmol/L dNTPs、Taq DNA聚合酶 1.0 U、1.00 μmol/L引物、2.75 mmol/L Mg2+、DNA模板30 ng。利用优化的 ISSR-PCR 反应体系能够扩增获得清晰、稳定的DNA条带，可用于后续的葡萄种质资源遗传多样性分析。
Abstract:
-

参考文献/References:

［1］黄远飞. 葡萄种质资源RAPD分析及亲缘关系研究［D］. 长沙：湖南农业大学，2005.
［2］吴子龙，方连玉，王军，等. 15份葡萄种质亲缘关系的ISSR分析［J］. 果树学报，2006，23(4)：605-608.
［3］吴子龙，王军，沈育杰，等. 山葡萄种内遗传多样性的SSR分析［J］. 果树学报，2008，25(6)：821-827.
［4］张淑静. 葡萄SSR反应体系的建立及遗传多样性分析［D］. 保定：河北农业大学，2008.
［5］郭大龙，张君玉，刘崇怀. 葡萄SRAP反应体系优化及引物筛选［J］. 基因组学与应用生物学，2010，29(2)：379-384.
［6］张君玉，郭大龙，龚莹，等. 葡萄目标起始密码子多态性反应体系的优化［J］. 果树学报，2011，28(2)：209-214.
［7］赖呈纯，范丽华，谢鸿根，等. 葡萄ISSR-PCR反应体系的建立与优化［J］. 生物技术通报，2012(2)：159-164.
［8］代培红，朱瑜，姚正培，等. 葡萄种质资源ISSR-PCR反应体系的建立与优化［J］. 南方农业学报，2013，44(8)：1258-1262.
［9］田淑芬，李树海，高杨，等. 玫瑰香葡萄不同时期叶片提取DNA纯度的比较［J］. 天津农业科学，2003，9(2)：5-7.
［10］徐美隆，章雨，倪细炉. 一种高质量葡萄基因组DNA提取方法［J］. 北方园艺，2011(15)：172-174.
［11］王果平，樊丛照，李晓瑾，等. 新疆贝母 DNA 提取及 ISSR-PCR 体系的建立与优化［J］. 种子，2012，31(8)：27-30， 35.
［12］周俊亚，宾晓芸，彭云滔，等. 罗汉果ISSR-PCR反应体系的建立［J］. 广西师范大学学报：自然科学版，2004，22(3)：81-84.
［13］贺佳，丁小余，褚必海，等. 泽泻ISSR反应体系的建立与优化［J］. 南京师大学报：自然科学版，2006，29(3)：86-90.
［14］姚明哲，王新超，陈亮，等. 茶树ISSR-PCR反应体系的建立［J］. 茶叶科学，2004，24(3)：172-176， 206.
［15］汪结明，项艳，吴大强，等. 杨树ISSR反应体系的建立及正交设计优化［J］. 核农学报，2007，21(5)：470-473， 513.
［16］付燕，罗楠，杨芩，等. 枇杷属植物ISSR反应体系的建立和优化［J］. 果树学报，2009，26(2)：180-185.
［17］宣继萍，章镇. 适合于苹果的ISSR反应体系的建立［J］. 植物生理学通讯，2002，38(6)：549-550.
［18］刘晓静，王文泉，郭凌飞. 益智ISSR-PCR反应体系建立与优化［J］. 生物技术，2008，18(3)：33-37.
［19］隋晓青，王堃. 克氏针茅ISSR-PCR反应体系的建立与优化［J］. 草业学报，2008，17(3)：71-78.
［20］曾黎辉，洪自同，许家辉，等. 龙眼ISSR反应体系的建立和优化［J］. 中国农学通报，2007，23(9)：111-114.
［21］赵丽华. 石榴ISSR-PCR反应体系的正交设计优化［J］. 北方园艺，2010(19)：148-152.

相似文献/References:

[1]芮东明,刘亚柏,刘吉祥,等.句容市葡萄产业现状及葡萄栽培技术特点[J].江苏农业科学,2013,41(04):136.
[2]思彬彬,张靠稳,孟北乾.雌根结线虫DNA的提取方法[J].江苏农业科学,2013,41(06):27.
　Si Binbin,et al.DNA extraction method of female Meloidogyne spp.[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(09):27.
[3]毛妮妮,刘照亭,刘伟忠,等.观赏性葡萄开屏式培植技术[J].江苏农业科学,2014,42(12):224.
　Mao Nini,et al.Spreading tail cultivation techniques of ornamental grapes[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(09):224.
[4]刘伟忠,毛妮妮,郭建,等.醉金香葡萄的引种表现及省力化栽培技术[J].江苏农业科学,2015,43(12):199.
　Liu Weizhong,et al.Introduction performance and laborsaving cultural techniques of “Zuijinxiang” grape[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2015,43(09):199.
[5]汪纯凤,王勇,陈英,等.抗葡萄白腐病菌放线菌株的筛选、纯化与鉴定[J].江苏农业科学,2015,43(12):166.
　Wang Chunfeng,et al.Screening，purification and identification of Actinomycetes with resistance to Coniothyrium diplodiella[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2015,43(09):166.
[6]陈剑侠.葡萄叶片和果实对硒的吸收和累积特性[J].江苏农业科学,2013,41(07):154.
　Chen Jianxia.Absorption and accumulation of selenium in leaves and fruits of grape during different growth stages[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(09):154.
[7]付瑞敏,韩鸿鹏,张丽琴,等.葡萄霜霉病和白粉病拮抗菌的分离、鉴定和He-Ne 激光诱变[J].江苏农业科学,2013,41(08):122.
　Fu Ruimin,et al.Isolation and identification of antagonistic bacteria against grape downy mildew and powdery mildew，and its mutation under He-Ne laser irradiation[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(09):122.
[8]郑舒文,田有亮,白玉娥,等.沙地云杉ISSR-PCR反应体系的初步优化[J].江苏农业科学,2014,42(08):48.
　Zheng Shuwen,et al.Preliminary optimization of ISSR-PCR reaction system of Picea mongolica[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2014,42(09):48.
[9]吕良玉,温晓蕾,杨娜娜,等.葡萄生长后期不同叶位与霜霉病发病级下叶片的光合特性[J].江苏农业科学,2013,41(09):141.
　Lv Liangyu,et al.Photosynthetic characteristics of leaves with different leaf positions and grades of downy mildew in late growth stage of grape[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(09):141.
[10]钱亚明,吴伟民,赵密珍,等.江苏5个葡萄试验示范基地土壤肥力状况调查分析[J].江苏农业科学,2013,41(09):145.
　Qian Yaming,et al.Investigation and analysis of soil fertility in five grape pilot demonstration bases of Jiangsu Province[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2013,41(09):145.

备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2015-08-11
基金项目：新疆维吾尔自治区重大科技专项(编号：201130102-1-3)。
作者简介：张娜(1989—)，女，新疆奇台人， 硕士研究生，主要从事植物生理与分子生物学研究。E-mail：zhangna7887@sina.com。
通信作者：李群，博士，副教授，主要从事植物逆境生理与分子机制研究。E-mail：liqun_007@126.com。
更新日期/Last Update: 2016-09-25