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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第45卷

期数:

2017年13期

页码:

153-157

栏目:

贮藏加工与检测分析

出版日期:

2017-07-05

文章信息/Info

Title:

A method for rapid micro-determination of protein glutaminase activity and its application in primary screening

作者:

何灿;  周易;  葛曦雨;  曲瑞丹;  严文娟;  王文君;  高红亮;  黄静

华东师范大学生命科学学院，上海 200241

Author(s):

He Can; et al

关键词:

苯酚-次氯酸盐法; 快速微量化; Δmaxv; 蛋白质谷氨酰胺酶

Keywords:

-

分类号:

TS201.3

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

通过对苯酚-次氯酸盐法(试管体系)反应体系微量化，借助酶标仪动态检测96孔板中蛋白质谷氨酰胺酶与底物产生氨的最大速度Δmaxv，对于不同浓度的标准PG样品与不同酶活的发酵液，Δmaxv与酶活间呈显著正相关(r=0.999、r=0.890)，故用Δmaxv代替酶活进行快速测定。选用96孔板作为快速测量体系，标准PG样品与发酵液在96孔板内部60孔中Δmaxv变异系数分别为10%、18%。利用该方法进行亚硝酸钠(nitrite，NIT)诱变初筛，0.6 mg/mL 的NIT处理10⁹ CFU/mL菌液20 min，涂板后筛选400株菌株样本，利用该方法最终得到1株是出发菌株酶活1.825倍且稳定性良好的菌株，可继续作为出发菌株应用于后续诱变筛选工作中。该方法可以准确、快速地提高诱变初筛的效率，为以后的育种工作奠定了基础。

Abstract:

-

参考文献/References:

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相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2016-01-28
基金项目：国家自然科学基金(编号：31170920)；大夏大学生科研基金项目(编号：2014DX-333)。
作者简介：何灿(1992—)，女，安徽六安人，硕士研究生，主要从事食品微生物研究。E-mail：hc13524170366@163.com。
通信作者：黄静，博士，副教授，主要从事食品微生物研究。E-mail：jhuang@ecnu.bio.edu.cn。

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更新日期/Last Update: 2017-07-05