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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:

第50卷

期数:

2022年第14期

页码:

166-169

栏目:

畜牧兽医与水产蚕桑

出版日期:

2022-07-20

文章信息/Info

Title:

Auto-induction secretory expression and immunogenicity analysis of a nontoxic recombinant Clostridium perfringens α-toxin

作者:

魏后军; 范志宇; 胡波; 仇汝龙; 陈萌萌; 宋艳华; 徐为中; 王芳

江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程重点实验室，江苏南京 210014

Author(s):

Wei Houjun; et al

关键词:

产气荚膜梭菌; α毒素; 自诱导; 分泌表达; 免疫原性

Keywords:

-

分类号:

S852.4

DOI:

-

文献标志码:

A

摘要:

为获得分泌表达的无毒性产气荚膜梭菌α毒素重组蛋白并分析其免疫原性，根据A型产气荚膜梭菌α毒素基因序列，对α毒素的第176位组氨酸突变为天冬酰胺，同时对信号肽序列进行密码子优化，将化学合成的该序列插入到载体pET32a，获得重组质粒pET32a-αH176N，将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，通过自诱导的方法分泌表达重组αH176N蛋白。SDS-PAGE及Western blot分析结果显示，αH176N蛋白在乳糖1~2 g/L、28 ℃诱导条件下高效分泌表达。卵磷脂酶试验及小鼠毒力试验显示，αH176N蛋白失去磷脂酶C活性及毒性。免疫保护试验结果显示，αH176N蛋白与氢氧化铝胶配制成的疫苗，以0.25 mL/只免疫试验兔就能达到100%(6/6)的免疫保护效果，优于传统灭活疫苗免疫2 mL/只的保护效果。

Abstract:

-

参考文献/References:

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相似文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:

收稿日期：2022-04-14
基金项目：江苏省农业科技自主创新资金［编号：CX(19)2017］；现代农业产业技术体系建设专项(编号：CARS-43-C-1)。
作者简介：魏后军(1986—)，男，江苏南京人，硕士，助理研究员，从事家兔疾病防治与兽医生物技术研究。E-mail：whj280941235@126.com。
通信作者：王芳，博士，研究员，从事家兔重要疫病致病机制及防控技术研究。E-mail：rwangfang@126.com。

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更新日期/Last Update: 2022-07-20