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[1]张丹,颜梦秋,张美彦,等.香菇微卫星标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用及正交优化[J].江苏农业科学,2021,49(5):57-61.
　Zhang Dan,et al.Application and orthogonal optimization of denaturing polyacrylamide gel electrophoresis with microsatellite labeling of Lentinus edodes[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2021,49(5):57-61.
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香菇微卫星标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用及正交优化(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第49卷
期数:
2021年第5期
页码:
57-61
栏目:
生物技术
出版日期:
2021-03-05

文章信息/Info

Title:
Application and orthogonal optimization of denaturing polyacrylamide gel electrophoresis with microsatellite labeling of Lentinus edodes
作者:
张丹; 颜梦秋; 张美彦; 谭琦; 宋春艳; 尚晓冬
上海市农业科学院食用菌研究所/农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室/
国家食用菌工程技术研究中心/上海市农业遗传育种重点实验室，上海 201403
Author(s):
Zhang Dan; et al
关键词:
香菇; 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳; 微卫星标记; 正交试验设计; 银染试验
Keywords:
-
分类号:
S646.1+20.1
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种高效鉴定微卫星分子标记的方法，广泛应用于种质鉴定、遗传连锁图谱构建及分子标记辅助育种等研究中。该方法由于操作繁琐，目前在食用菌领域的应用尚不广泛。以香菇为研究对象，建立变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测流程，并利用正交试验对检测流程中涉及的加样缓冲液与PCR反应液的体积比、95 ℃变性时间、置于冰上冷却时间、银染时间、银染后胶板去离子水洗时间等5个操作节点进行优化。结果表明，加样缓冲液与PCR反应液体积比为1∶2，95 ℃变性2~5 min，置于冰上冷却15~20 min，银染7 min，银染后胶板用去离子水洗5~10 s是正交试验的较优处理组合。试验建立了香菇微卫星标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测操作规程，该操作规程具有成本低、效率高、易批量化操作等优点，对其他食用菌微卫星标记的应用具有重要的参考价值。
Abstract:
-

参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2020-07-18
基金项目：上海市食用菌产业技术体系建设专项资金［编号：沪农科产字(2019)第9-03号］；现代农业产业技术体系建设专项资金(编号：CARS-20)。
作者简介：张丹(1986—)，男，江苏泗洪人，硕士，助理研究员，从事食用菌育种研究。E-mail：zdfungi@126.com。
通信作者：尚晓冬，博士，研究员，从事食用菌遗传育种研究。E-mail：xdshang@163.com。
更新日期/Last Update: 2021-03-05