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[1]何丹,刘媛,李先保,等.微囊藻毒素LR免疫原及包被抗原的合成与鉴定[J].江苏农业科学,2019,47(09):226-230.
　He Dan,et al.Synthesis and identification of immunogens and coating antigens of microcystin LR[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2019,47(09):226-230.
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微囊藻毒素LR免疫原及包被抗原的合成与鉴定(PDF)
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《江苏农业科学》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第47卷
期数:
2019年第09期
页码:
226-230
栏目:
贮藏加工与检测分析
出版日期:
2019-05-27

文章信息/Info

Title:
Synthesis and identification of immunogens and coating antigens of microcystin LR
作者:
何丹1; 2;  刘媛2;  李先保1;  龚航1; 2;  王丽1;  郝佳2;  张晓帅2;  徐重新2;  张存政2;  刘贤金2
1.安徽科技学院，安徽滁州 233100； 2.江苏省食品质量安全重点实验室，江苏南京 210014
Author(s):
He Dan; et al
关键词:
微囊藻毒素LR; 抗体; 免疫原; 包被原; 鉴定
Keywords:
-
分类号:
X52
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
微囊藻毒素LR(MC-LR)分子量小于1 000 u，为半抗原，需要与载体蛋白偶联后才能刺激免疫应答用于抗体制备。本研究利用碳二亚胺法将MC-LR分别与钥孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)进行偶联，获得免疫抗原(MC-KLH)和包被抗原(MC-BSA)。采用紫外扫描光谱、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)等3种方法对2种人工抗原进行鉴定，并对小鼠进行免疫。用间接非竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA)和竞争ELISA测定了抗血清效价和敏感度。结果表明，紫外扫描光谱法可观察到2种人工抗原的紫外吸收谱与载体蛋白相比发生改变。通过SDS-PAGE法可以观察到MC-BSA分子量比BSA增大。另外质谱法测定的MC-BSA的相对分子量为76 515.84，计算得到的MC-LR与BSA的偶联比为10 ∶ 1。MC-KLH免疫小鼠后，抗血清效价最高达到1 ∶ 32 000倍，MC-LR对鼠多抗血清的抑制中浓度(I50)为0.53 μg/mL。成功合成了MC-LR的免疫原和包被原为其单克隆抗体的制备奠定了基础。还比较了3种鉴定方法的适用性和优缺点，为其他人工抗原的鉴定方法提供了有益的参考。
Abstract:
-

参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:
收稿日期：2018-01-29
基金项目：国家自然科学基金(编号：31701724)；安徽省家禽产业技术体系基金(编号：AHCYTX-10)；江苏省社会发展项目 (编号：BE2017706)；江苏省农业科技自主创新资金［编号：CX(15)1016］。
作者简介：何丹(1993—)，女，河南商丘人，硕士研究生，研究方向为食品加工与安全。E-mail：hehe_88daner@163.com。
通信作者：李先保，博士，教授，主要从事畜产品加工研究。E-mail：Lxb63@163
更新日期/Last Update: 2019-05-05